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网织红细胞、血沉
网织红细胞计数(RC)
检验目的
网织红细胞是没有完全成熟的红细胞内残存的核糖核酸(RNA)经特殊染色后成网状结构。网织红细胞计数的目的是有助于作骨髓造红细胞的能力。
检验原理
网织红细胞是没有完全成熟的红细胞,其胞浆内尚存有嗜碱性的核糖核酸(RNA)物质,经煌焦油蓝或新亚甲蓝活体染色后呈浅蓝或深蓝色的网状结构。
标本采集
3、标本
3.1 末梢血糖采集方法:标本采集后应立即进行染色。
3.2 静脉血采集方法:用含有EDTA-K2抗凝真空采集管采集血液,标本应在4小时内进行处理,若保存4时可延迟到8小时。
4、设备和试剂
4.1 日本OLYMPUS公司的CH—2显微镜。
4.2 试管、玻片、Miller窥盘(置于显微镜目镜内)等。
4.3 10g/L煌焦油蓝生理盐水溶液。
5、操作步骤
5.1 试管法:于小试管内滴加1滴煌焦油蓝生理盐水溶液。
5.2 假如2滴末梢血(抗凝静脉血),并与试管中混匀。
5.3 静置15——20分钟后,取1滴制成涂片。
5.4 油镜下观察1000个红细胞中网织红细胞,法定单位报告。
6、干扰因素
6.1 活体染色体时间不能过短,室温过低时可置于37温箱。
6.2 每次制片2张,每张计数500个红细胞,避免分布不均匀引起误差。
6.3 试剂应定期更换,以免变质。
6.4 因操作误差大,不宜用玻片直接染色法。
7、网织红细胞绝对值计算
ARC?网织红细胞数/L=计数500个RBC所见网织红细胞数
X 2/1000
8、生物参考值区间
正常人网织红细胞:成人0.005——0.015 绝对值(24——84)?×109/L
新生儿0.03——0.06 绝对值(144——336)×109/L
9、实验室解释
9.1 网织红细胞数值可反映骨髓造血功能的状态,可作为贫血治疗疗效观察的指标。
9.2 减少:常见于再生障碍性贫血、苯中毒等。
9.3 增多:表示骨髓造血功能旺盛,见于溶血性贫血,出血性贫血,恶性贫血,以及缺铁性贫血和巨幼细胞贫血治疗有效时。
9.4 如发现网织红细胞低于正常时,应慎重地反复检查并核实,并计算其绝对值。
9.5 在癌转移白血病、脾脏疾病时,网织红细胞亦有不同程度的增多,但不伴随血液内红细胞的增加,这种增加不表示红细胞生成旺盛。
10、异常结果处理
如网织红细胞计数结果异常,需与临床诊断相符合,不符合的结果应复查。
11、报告时间与标本保存
11.1 网织红细胞计数结果应在3小时内出报告,病房患者检验结果报告单在24小时内发回科室,门诊病人检验结果在当天下午领取报告结果。
11.2 网织红细胞计数检查过的标本不保存,制好的血推片可保存一周。
12、操作性能
本试验是目测法,检验结果的精密度欠佳,ICSH推荐使用Miller窥盘法进行显微镜目测计数,由于仪器法计数细胞数目多,结果的精密度较手工法好,将是未来网织红细胞计数的趋势所在。
13、参考文献
1 王宇主编. 全国临床检验操作规程. 中华人民共和国卫生部医政司. 南京. 第三版.2006.
红细胞沉降率测定(ESR)魏氏法
1 检查目的
红细胞沉降率是指红细胞于一定的条件下在plasma中沉降的速度,ESR的检查属非特异性试验,在许多病理情况下,ESR均可增快,但由于ESR操作简单,将ESR结果结合临床资料及其他检查结果进行分析时,对判断机体有无炎症、病变有无活动性以及治疗效果的好坏有重要的参考价值,故ESR检查临床上仍在广泛应用。
2 检测原理
在血液中,由于红细胞膜表面的唾液酸带有负电荷而相互排斥,使细胞分散悬浮而下沉缓慢。在Westergren method (魏氏法)中,将一定血液抗凝后,置于特制的玻璃管中,测定红细胞在一定时间内下降的距离,称红细胞沉降率测定(ESR),简称血沉。
3 标本采集
3.1 红细胞沉降率测定(ESR)标本采集是一个重要的步骤,采集标本的好坏直接影响检测结果。
3.2 要求用采血器(注射器或真空采血器)在30秒内取出静脉血,同时压脉带束臂时间不宜过长。
3.3 一般应用抗凝剂浓度为109mmol/L(32.08g/L)的枸橼酸钠,抗凝剂与血液之比为准确的1:4。
3.4 按静脉采血的方法用采血器(注射器或真空采血器)抽取1.6ml的血液,注入含有109mmol/L(32.08g/L)的枸橼酸钠0.4ml的试管内,立即颠倒混匀数次,注意不要用力过猛。
4 设备与试剂
4.1 Westergren 血沉架,符合标准的血沉管,或一次性使用的标准血沉管(VACUETTE Single-use pipettes ESR)。
4.2 109mmol/L(32
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