地塞米松、苯巴比妥钠和利多卡因对昆明种小鼠肝P4503A酶的影响论文.docVIP

　　地塞米松、苯巴比妥钠和利多卡因对昆明种小鼠肝P4503A酶的影响论文 .freelRNA表达的改变. 结果 与正常对照组相比，地塞米松组小鼠MEGX累积排泄量增加35.0%（P 0.05），P4503A酶蛋白含量增加147.1%（P 0.01）;苯巴比妥钠小鼠MEGX累积排泄量增加23.4%（P 0.05），酶蛋白含量增加43.6%（P 0.01）;各组间P4503A酶mRNA表达无明显差别. 结论 地塞米松和苯巴比妥钠对昆明种小鼠肝P4503A酶有诱导作用，该作用位于转录后水平;利多卡因对昆明种小鼠肝P4503A酶无影响. Keyethasone;phenobarbital;lidocaine;hepatic P4503A enzyme;mice Abstract:AIM To study the induction of dexamethasone，phenobarbital and lidocaine on hepatic P4503A enzyme in Kunming mice.METHODS After administering ip a non-toxic dose of dexamethasone，phenobarbital or lidocaine to Kunming mice for7d.freeletabolite catalyzed by hepatic P4503A en-zyme，the content of hepatic P4503A enzyme and its mRNA expression ice as control，the urinary recovery of MEGX increased by35.0%and23.4%（P 0.05）;and the content of hepatic P4503A en-zyme increased by147.1%and43.6%（P 0.01）in mice pretreated ethasone or phenobarbital，respective-ly，but not mRNA nor the pretreatment ent ethasone and phenobarbital may induce hepatic P4503A enzyme，RNA表达为指标，研究了地塞米松、利多卡因和苯巴比妥钠对昆明种小鼠肝微粒体P4503A酶的诱导作用及其作用机制. 1 材料和方法 1.1 材料 苯巴比妥钠，上海新亚药业公司生产，批号9501121;利多卡因，上海旭东海普药业有限公司生产，批号9802022;甘草酸，江苏天晴制药厂生产，批号9608071;CYP4503A酶ELISA试剂盒，购于Amer-sham Pharmacia Biotech UR公司;PCR试剂盒，购于MRI公司;柱离心式胶回收试剂盒，购于华顺生物试剂公司;MEGX第二军医大学药学院药化教研室李克教授馈增;PCRmark，购于华美生物工程公司，其余试剂均为国产分析纯或优级纯.P/ACE5000型毛细管电泳仪，美国Beckman公司制造;GA2400型PCR仪，PE公司制造;EL-808型酶标仪，美国Bio-Tek公司制造;SCR-300型电泳仪，上海万达生物工程公司制造;ZF-1型紫外透射分析仪，上海长明电子仪器厂生产.昆明种小白鼠，雄性，体质量（20±2.0）g，购于中科院上海实验动物中心，清洁级，证书号:005.给予标准化光照及饮食.毛细管:长57cm，有效长度50cm，直径59μm;电解液;50mmol L-1 硼酸缓冲液（pH=8.4）;电压:1500V;电流:9.4～11.6μA;温度:23℃;检测波长:214nm;内标:氨茶碱. 1.2 方法 1.2.1 利多卡因试验 小鼠36只，随机分成4组，每组9只.A组给予2g L-1 苯巴比妥钠0.5mL，B组给予0.8g L-1 利多卡因注射液0.5mL，C组给予0.2g L-1 地塞米松0.5mL;D组为正常对照组，给予等量生理盐水，ip，1次/d.连续诱导1g kg -1 ，将小鼠置于玻璃代谢笼中，收集5h尿液.测量尿液体积后，-20℃保存.解剖肝脏，分成二等份，-80℃保存.取尿液0.2mL，加0.1mol L -1 醋酸钠缓冲液（pH=5.0）0.18mL，8.33g L-1 氨茶碱10μL和β葡萄糖醛酸-硫酸酶20μL，37℃反应18h.加甲醇0.2mL，10000g离心15min，取上清液，高效毛细管电泳测定MEGX含量. 1.2.2 小鼠肝微粒体P4503A酶含量测定 取-80℃保存的肝组织0.30g，加TMS缓冲液1.7mL，匀浆，10000g离心