垂体瘤转化基因在多发性骨髓瘤患者中表达的研究论文.docVIP

　　垂体瘤转化基因在多发性骨髓瘤患者中表达的研究论文 王昭 鹿全意 陈萍 张鹏 丛雅琴 【摘要】 为了研究垂体瘤转化基因（pituitary tumor-transforming gene, PTTG）在老年多发性骨髓瘤（multiple myeloma， MM）患者中的表达并分析它与MM发生的关系，采用RT-PCR方法检测33例MM患者及10例正常对照者骨髓单个核细胞中PTTG的表达。 结果表明： MM患者PTTG在MM中的表达水平(0.3415±0.2172 )明显高于正常对照组(0.0590±0.0233) (P 0.05)。 结论： PTTG的过度表达可能与MM的发生发展有关，这为MM的发病机制及其基因靶向治疗的研究提供了新的思路。 【关键词】 垂体瘤转化基因 多发性骨髓瘤 逆转录聚合酶链反应 垂体瘤 Expression of Pituitary Tumor-Transforming Gene in Patients a AbstractTo explore the expression of pituitary tumor-transforming gene (PTTG) in elderly patients ultiple myeloma （MM）and its relationship RNA arroononuclear cells （BMMNC） from 33 patients al controls by using reverse transcriptase-polymerase chain reaction (RT-PCR) . The results shoRNA in MM patients (0.3415±0.2172) al controls (0.0590±0.0233) (P＜0.05). It is concluded that the overexpression of oncogene PTTG may be related to genesis and progression of MM. It provided a neor-transforming gene； multiple myeloma; reverse transcription-polymerase chain reaction; pituitary tumor 多发性骨髓瘤（MM）是一种浆细胞恶性增生性血液肿瘤，患者骨髓内有大量异常浆细胞增殖，血清中出现异常的单克隆免疫球蛋白。发病率占血液肿瘤的10％，中、老年人中发病率较高。新近报道的癌基因垂体瘤转化基因（pituitary tumor-transforming gene , PTTG），其高表达在促进细胞增殖、转化及肿瘤发生中具有十分重要的作用, PTTG在恶性肿瘤中的高表达和转化能力证实了其与肿瘤的发生有关［1］。国内外已有报道PTTG在胃癌［2］和乳腺癌 ［3］等多种肿瘤中高表达.freela公司）由下列成分组成： GIT变性液（10 ml）， 2 mol/L NaOAc (pH 4.0)(1 ml)，MMLV 逆转录酶200 U/μl(20 μl)，逆转录反应体系，Taq DNA 聚合酶1 U/μl (40 μl)，PCR反应体系，去RNase水。水平电泳槽为北京六一试验仪器厂产品；PTC-150型PCR扩增仪为美国MJ Reseach公司产品；EC250-90多功能电泳仪为美国EC公司产品；ZF-4型多功能紫外投射反射分析仪为上海长明光学电子仪器厂制造； 1D Image Analysis Softl并将其注入EDTA抗凝试管中, 加入4 ml PBS(pH 7.4)缓冲液稀释。采用淋巴细胞分离液密度梯度离心法分离单个核细胞，-80℃保存备用。 总RNA的提取采用异硫氰酸胍－苯酚－氯仿一步法提取细胞总RNA。 所抽提总RNA经分光光度计测定260和280 nm处吸光度（A）值，A260/A280值在1.85-1.98者用于RT-PCR。 引物设计PTTG引物序列： P1 5-CGATGCCCCACCAGCCTTACC-3，P2 5-CAAGCTCTCTCTCCTCGTCAAGG-3，扩增产物317 bp； β-actin引物序列: P1 5- GTGGGGCGCCCCAGGCACCA -3， P2 5－CTCCTTAATGTCACGCACGATTTC-3，扩增产物539 bp。 引物由上海生工生物工程技术服务有限公司合成。 逆转录反应（RT）在经DEPC处理过的0.5 ml Eppendorf管中加入逆转录反应体系： 细胞总RNA 1 μg, MMLV-RT（Moloney murine leukemia virus revers