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- 2017-06-16 发布于广东
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大乌泡叶中总黄酮含量测定论文.doc
大乌泡叶中总黄酮含量测定论文
.freel处有最大吸收。重复性、精密度、加样回收率试验的RSD值分别为2.11%、0.97%、2.34%,含量测定结果表明大乌泡叶中总黄酮含量为3.8%。结论 以60%甲醇提取、硝酸铝显色、510 nm测定的分光光度法适用于大乌泡叶中总黄酮含量的测定。
【关键词】 大乌泡;总黄酮;含量测定;分光光度法
Abstract:Objective To supply scientific basis for the reasonable development and utilization of Rubus multibracteatus Levl. et Vant. resources. Method The total flavonoids Rubus multibracteatus Levl. et Vant. ethanol and its content ined by spectrophotometry. The reliability and repeatability of the method ents. Result Both standard and tested solutions had the maximum absorbance at 510 nm. The RSD values of repeatability, accuracy and recovery experiments ination shoultibracteatus Levl. et Vant. ethanol, colored iniumnitrate and determined by spectrophotometry at 510 nm ination of total flavonoids in Rubus multibracteatus Levl.et Vant..
Key ultibracteatus Levl.et Vant.;total flavonoids;content determination;spectrophotometry
大乌泡为蔷薇科悬钩子属植物大乌泡(Rubus multibracteatus Levl. et Vant.),又名倒生根、黄水泡、无刺乌泡、糖泡叶、马莓叶,以根及全株入药。全国大部分地区均有分布,.freelultibracteatus Levl.et Vant.),标本存放于中药复方新药开发国家工程研究中心。甲醇为分析纯,5%亚硝酸钠、10%硝酸铝、4%氢氧化钠等均采用分析纯自配。
2 方法与结果
2.1 供试品溶液的制备
干燥大乌泡叶粉末约2.0 g,精密称定,置索氏提取器中,加入60%甲醇100 mL,于恒温水浴锅上90 ℃提取6 h,过滤,减压浓缩并定容至50 mL容量瓶中,得供试品溶液。
2.2 芦丁对照品溶液的制备
精密称取干燥至恒重的芦丁对照品4.75 mg,用少量60%甲醇溶解,置50 mL容量瓶中,用60%甲醇定容至50 mL,摇匀,静置,配成浓度为95 μg/mL的芦丁对照品贮备液。
2.3 测定波长的选择
以芦丁为对照品测定大乌泡叶中总黄酮的含量。精密吸取对照品液、供试品液各适量分别加入到25 mL容量瓶中,按“2.4”项下方法操作,并在400~600 nm范围内扫描,结果均在510 nm处有最大吸收波长,其他成分对测定无干扰,故选择510 nm为测定波长。
2.4 标准曲线的绘制
精密吸取浓度为95 μg/mL的芦丁对照品溶液0、1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0 mL,分别置于25 mL量瓶中,分别加入5%亚硝酸钠溶液1.0 mL,摇匀,放置6 min后各加入10%硝酸铝溶液1.0 mL,摇匀后放置6 min,分别加入4%氢氧化钠溶液10 mL,用60%甲醇稀释至刻度,摇匀,放置10 min,在510 nm处测定吸光度。回归方程为:Y=0.001 2X+0.001,r=0.999 6。结果表明,芦丁对照品溶液浓度在95~570 μg/mL之间呈良好的线性关系。
2.5 方法学考察
2.5.1 精密度试验
精密吸取95 μg/mL芦丁对照品溶液5.0 mL,置于25 mL量瓶中,按“2.4”项下方法进行显色和测定,重复6次实验,记录吸光度。吸光度的RSD=0.97%(n=6),说明仪器精密度良好。
2.5.2 重复性试验
精密称取样品6份,每份约2.0 g,精密称定,按“2.1”项下方法制备供试品溶液,每份精密吸取1.0 mL,分别置于10 mL容量瓶中,按“2.4”项下方法进行显色和测定,记录吸光度值,计算每份样品的含量。6份样品黄酮含量的RSD=2.11%(n=6)。
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