大孔树脂吸附分离纯化玉屏风复方中色原酮苷的研究论文.docVIP

　　大孔树脂吸附分离纯化玉屏风复方中色原酮苷的研究论文 杨克迪，葛利，李宏，唐文，龙云飞 【摘要】 目的大孔树脂吸附分离纯化玉屏风复方提取物中色原酮苷成分。方法采用静态吸附实验考察D101，AB8，S8，X5等7种大孔吸附树脂对升麻苷和5O甲基维斯阿米醇苷两种色原酮苷的吸附效果.freelone glycoside from the extract of Yupingfeng acroporous resin absorption.MethodsThe resin suitable for separation of chromone glycoside ined by static absorption experiment on seven different kinds of resins, and further more, the absorption and elution of chromone glycoside on the selected resin ent. ResultsThe AB-8 resin one glycoside. The experiment results shoone glycoside in the extract of Yupingfeng increased from 0.55% to 10.01% ent of chromone glycoside in extract of Yupingfeng. Key one glycoside； Macroporous resin absorption； Separation and purification 玉屏风复方是中医用于扶正的经典名方，由黄芪、白术、防风3味药材组成，升麻苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷等色原酮苷是玉屏风主要活性成分之一［1］。目前，玉屏风制剂生产中，很少对玉屏风提取物中色原酮苷、皂苷等活性成分富集、纯化，制剂中活性成分含量较低。大孔树脂吸附分离技术可有效富集中药活性部位，是提高中药制剂水平的一种有效方法［2～4］。本实验探讨了玉屏风提取物中升麻苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷两种色原酮苷的大孔树脂吸附分离，旨在为玉屏风制剂的生产和改进提供一定参考。 1 仪器和试药 Agilent 1100高效液相色谱仪 (美国Agilent公司)； B-688恒流泵 (瑞士Buchi公司)；LABOROTA 4000 旋转蒸发器(德国Heidolph公司)；THZ-82恒温震荡器（江苏太仓华美生化仪器厂）。 黄芪（批、防风（批、白术（批，购于广西一心药业公司，经鉴定符合2005年版《中国药典》(Ⅰ部)相关项下规定；升麻苷（批号 0781-20011）及5-O-甲基维斯阿米醇苷（批号 1523-200203）对照品（中国药品生物制品检定所）；D101，AB-8，S-8，NKA-9，D3520，D4020，X-5大孔树脂购于南开大学化工厂；精制玉屏风复方提取物（色原酮苷含量为9.4%），自制。 2 方法 2.1 升麻苷和5-O-甲基维斯阿米醇苷HPLC分析色谱条件为Zorbax SB-C18色谱柱(4.6 mm×150 mm，5 μm)，柱温30℃，以甲醇∶水=40∶60（V/V）为流动相，流速1 ml·min-1，检测波长254 nm。 2.2 树脂静态吸附与解吸分别称取预处理好的D101，AB-8，S-8等湿树脂各0.5 g置于50 ml锥型瓶中，加入色原酮苷（升麻苷、5-O-甲基维斯阿米醇苷）含量已知的玉屏风提取物溶液20 ml，在振荡器中以150 r·min-1的转速、30℃下振摇12 h。测定吸附平衡后溶液中色原酮苷的含量，计算树脂的平衡吸附量。 称取色原酮苷吸附量已知的树脂置于50 ml的锥形瓶中，加入95%的乙醇溶液20 ml，在振荡器上以150 r·min-1的转速,30℃下振摇12 h，计算色原酮苷解吸率。 2.3 固定床吸附分离筛选出的树脂湿法装于Φ1.0 cm×20 cm吸附柱中，树脂高度10 cm，取色原酮苷含量已知的料液以一定流速连续流过树脂柱，每20 ml分段接收流出液，分析流出液中色原酮苷的含量。固定床吸附结束后，以4倍床层体积去离子水洗柱，然后用洗脱剂连续洗脱。 3 结果与讨论 3.1 树脂筛选 表1为不同型号树脂在实验考察条件下对色原酮苷的吸附和解吸效果。D101，AB-8及X-5等树脂对色原酮苷均有一定吸附能力；AB-8和X-5树脂的解吸效果较好。综合考虑树脂的吸附能力及解析效果，AB-8树脂较适宜于玉屏风提取物中色原酮苷的吸附分离。表1 不同型号树脂对色原酮苷的吸附效果（略） 3.2 色原酮