大孔树脂对红凤菜总黄酮的吸附分离特性研究论文.docVIP

　　大孔树脂对红凤菜总黄酮的吸附分离特性研究论文 .freelacroporous resins for isolation and purification of total flavones from Gynura bicolor DC. (TFG). MethodsThe content of total flavones ic absorption and desorption tests acroporous resin．ResultsD101 and HPD-100 resins had good property to absorb and desorb TFG. ConclusionD101 and HPD-100 resins are better for usolation and purification of TFG. Key g于25 ml容量瓶中，以70%乙醇超声溶解，定容至刻度，得浓度为0.2 mg/ml的芦丁标准液。 精密移取0.0，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5 ml芦丁标准液至25 ml量瓶中，分别加入0.1 mol/L AlCl3·6H2O 1.0 ml，用70%乙醇定容至刻度，摇匀，放置15 min后于411 nm处测定吸光度，制备标准曲线。测得的标准方程为：Y= -0.0185 + 33.875X，R=0.999 56，其中Y为吸光度，X为试液中总黄酮含量（μg/ml）。结果表明芦丁在4～20 μg/ml的范围内吸光度与浓度呈良好的线性关系。 2.1.2 样品中总黄酮含量的测定精密移取待测样品液1 ml于25 ml的容量瓶中，加入0.1 mol/L AlCl3·6H2O 1.0 ml，用70%乙醇定容至刻度，摇匀，放置15 min后于411 nm处测定吸光度，代入标准曲线，计算总黄酮含量。 2.2 红凤菜总黄酮粗提物样品液的制备取红凤菜干品粉末400 g，用4 800 ml 70%乙醇热回流提取2 h，然后用4 000 ml 70%乙醇热回流提取2 h，合并两次提取液，浓缩挥去乙醇，置冰箱中冷却沉淀24 h后，5 000 r/min离心10 min，取上清液，以蒸馏水定容至500 ml，得红凤菜总黄酮粗提物样品液。经前述方法测定，其总黄酮含量为1.506 mg/ml，干燥后测得总黄酮含量为8.61%。 2.3 树脂的预处理大孔树脂用95%乙醇浸泡24 h，充分溶胀后，用95%乙醇淋洗至流出液与水混合（1∶3）不呈白色浑浊为止，然后以大量蒸馏水洗尽乙醇，室温晾干，备用。 2.4 大孔树脂静态吸附筛选实验 2.4.1 吸附量的测定精密称量经预处理的D101，NKA，HPD-100，HPD-722，AB-8，HPD-450，DM130，NKA-9，HPD-600，HPD-417干树脂各1.000 g，置三角瓶中，精密移取10.00 ml红凤菜总黄酮粗提物样品液，120 r/min振荡24 h。充分吸附后过滤，按照前述方法测定滤液中的总黄酮含量（以质量浓度表示，下同）。按照下列公式计算各型号树脂在室温下的吸附量及吸附率。 吸附量（mg/g）=（原液总黄酮含量×原液体积－吸附液总黄酮含量×吸附液体积）/树脂质量 吸附率（%）= ［（原液总黄酮含量－吸附液总黄酮含量）/原液总黄酮含量］×100% 2.4.2 解吸率的测定取“2.4.1”项中吸附饱和后的树脂，分别精密加入95%乙醇15.00 ml解吸附，120 r·min-1振荡24 h，过滤，按照前述方法测定滤液中的总黄酮含量。按照下列公式计算各型号树脂在室温下的解吸附率。 解吸附量（mg/g）=（解吸液总黄酮含量×解吸液体积）/树脂质量 解吸率（%）=解吸附量/吸附量×100% 2.5 大孔树脂动态吸附筛选实验 2.5.1 吸附量的测定分别取经预处理的D101，NKA，HPD-100，HPD-722，AB-8，HPD-450，DM130，NKA-9，HPD-600，HPD-417干树脂各3 g，湿法装柱（柱体积2 ml，大孔树脂床体积4 ml），加红凤菜总黄酮粗提物样品液10.00 ml于柱顶，以相同流速进行动态吸附，收集流出液，按照前述方法测定其中的总黄酮含量，计算总黄酮质量和树脂的上柱量。然后用蒸馏水清洗树脂床中未被吸附的成分，收集水洗液，按照前述方法测定其中的总黄酮含量，计算总黄酮质量和树脂的吸附量。计算公式如下： 上柱量（mg/g）=（原液总黄酮含量×原液体积－过柱流出液总黄酮含量×过柱流出液体积）/树脂质量 吸附量（mg/g）=（原液总黄酮含量×原液体积－过柱流出液总黄酮含量×过柱流出液体积－水洗脱液总黄酮含量×水洗脱液体积）/树脂质量 2.5.2 解吸率的测定将“2.5.1”项中充