常春油麻藤中刺芒柄花素的提取工艺研究论文.docVIP

　　常春油麻藤中刺芒柄花素的提取工艺研究论文 .freelL),85 ℃回流提取3次,每次1.5 h,常春油麻藤中刺芒柄花素含量为0.038 12%。结论 本研究优化确定了常春油麻藤中刺芒柄花素的提取方法。 【关键词】 常春油麻藤;刺芒柄花素;提取工艺 Abstract：Objective To establish the method of extraction and separation of formonoin in Mucuna sempervirens Hemsl.. Methods The extraction and separation conditions of formonoin L), ethanol refluxing and extracting for 3 times at 85 ℃, 1.5 h once, the content of formonoin al parameters for extraction and separation condition of formonoin in Mucuna sempervirens Hemsl. pervirens Hemsl.;formonoin;extraction process 常春油麻藤为豆科(Leguminosae)藜豆属(Mucuna)植物常春油麻藤(Mucuna sempervirens Hemsl.)的干燥藤茎,常作鸡血藤入药,具行血补血、通经活络的功效。民间长期使用表明,.freelm×4.6 mm,5 ?m);检测波长：249 nm;柱温：25 ℃;流动相：甲醇-水(55∶45);流速：1.0 mL/min;进样量：10 ?L。 2.1.2 对照品溶液制备 精密称取8.02 mg刺芒柄花素对照品,置于50 mL量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,即得浓度为160.4 ?g/mL刺芒柄花素对照品溶液,备用。 2.1.3 供试品溶液制备 精密称取2.0 g常春油麻藤药材粉末,置于100 mL圆底烧瓶中,按正交试验设计提取工艺,甲醇为提取溶剂,水浴加热回流,滤液浓缩至50 mL量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,经0.45 ?m微孔滤膜过滤,即得供试品溶液。 2.1.4 方法专属性考察 在上述色谱条件下,常春油麻藤中其他成分不干扰刺芒柄花素的测定,在该色谱条件下保留时间为12.51 min,色谱图见图1。 A B 注：A.对照品;B.样品;1.刺芒柄花素 图1 常春油麻藤HPLC图谱 2.1.5 标准曲线绘制 精密吸取刺芒柄花素对照品溶液,分别配制成1.604、3.208、6.416、16.04、32.08、80.2、160.4 ?g/mL系列浓度的溶液。按上述色谱条件测定,得线性回归方程：C=0.016 3A+0.334 6,r=0.999 9,刺芒柄花素在1.604～160.4 ?g/mL范围内线性关系良好。 2.1.6 精密度、稳定性和重复性考察 取同一供试品溶液,连续进样6次,测定刺芒柄花素峰面积,RSD=0.57%,说明精密度良好。取同一供试品溶液,分别在0、0.5、1、2、4、8、12 h分别测得刺芒柄花素峰面积,测得峰面积的RSD=1.8%,说明样品溶液在12 h内稳定。取同一批样品6份,按照供试品溶液制备方法制备并测定,测得刺芒柄花素的平均含量为0.038 23%, RSD=1.24%(n=6)。 2.1.7 加样回收率试验 精密称取2.0 g已知含量的常春油麻藤粉末,分别加入刺芒柄花素对照品适量,按照供试品溶液制备方法制备并测定。刺芒柄花素平均回收率为99.00%,RSD=0.85%,表明方法的回收率良好。 2.2 提取条件 2.2.1 正交试验因素和水平设计 以提取时间、料液比及提取次数为考察因素,每个因素选择3个水平,以刺芒柄花素含量为指标,编制L9(34)因素水平表,见表1。表1 L9(34)因素水平表 2.2.2 正交试验结果 以每克药材中刺芒柄花素含量为指标,正交试验结果见表2,其显著性检验见表3。表2 L9(34)正交试验结果 用直观分析法得出常春油麻藤中刺芒柄花素的提取影响因素为C B A,根据R值可以得出最佳工艺A2B3C3,即：料液比为1∶40(g∶mL),提取时间1.5 h,分3次、每次0.5 h,用甲醇加热回流提取。表3 刺芒柄花素含量方差分析 刺芒柄花素校正模型统计量F=1.395,所选模型有统计学意义,其中因素A、B、C的P 0.05,说明所选因素对试验结果的差异没有统计学意义。 2.2.3 验证试验 根据正交试验得出刺芒柄花素最佳提取工艺A2B3C3进行样品制备,测定刺芒柄花素含量为0.038 12%,证实A2B3C3为最佳提取工艺。 3 讨论