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水产品中孔雀石绿、结晶紫及其代谢产物的检测 背景 性质：孔雀石绿(MG,又名碱性绿、盐基块绿、孔雀绿)是一种带有金属光泽的绿色结晶体，属三苯甲烷类染料; 常被用于制陶业、纺织业、皮革业、食品颜色剂和细胞化学染色剂毒性作用： MG代谢物具有高毒性、高残留和致癌、致畸、致突变等副作用，并能在鱼体内长时间残留。 加拿大在1992年发现人类若进食含孔雀石绿的鱼类，会对健康构成重大影响，主要是孔雀石绿中的三苯甲烷基团所致。 质谱条件 离子化模式：电喷雾电离正离子模式ESI+ 干燥气温度350℃、 干燥气流速11L/min； 雾化器压力：35psi 毛细管电压：4000V 质谱扫描方式：多反应离子检测模式 操 作 步 骤（提取、净化） 均质样品称取5.0g 加入50.0μL内标（200ng/ml） 加入25mL乙腈，混匀，超声15min离心10000r/min，10min  5 ml乙腈活化中性氧化铝固相萃取柱（活化）  5mL经离心后的样品上清液，上样，并收集流出液 再加4 ml乙腈淋洗小柱并收集流出液（收集滤液共9.0mL）  流出液用50℃以下氮气吹干 用初始流动相溶解并定容至1.0ml（过0.22μm滤膜上机测定） 注：内标总质量10ng，取25mL提取液中的5.0mL净化、浓缩至1.0mL后上机测定，相当于该溶液浓度为2.0ng/g样品，与标准系列完全一致。 分析结果 加标鱼样品提取物的MRM色谱图1.0ng/g 孔雀石绿、无色孔雀石绿、结晶紫、无色结晶紫标准系列0.2-2.0ng/g 动物源性食品中β-受体激动剂残留检测方法 液相色谱－质谱/质谱法 （安捷伦6430） β-受体激动剂结构、分类 β-兴奋剂：一类人工合成的苯乙胺类药物 结构： 分类：苯酚型及苯胺型 性质：溶于多数极性或中等极性溶剂 方法原理、适用范围 a)方法原理 试样中β-受体激动剂残留经酶解后超声提取，低温离心后，上清液用安捷伦PCX固相萃取柱净化，液相色谱-质谱/质谱测定，基质加标外标峰面积法定量。 b)适用范围 猪肉、猪肝、猪肾等动物源性食品中克伦特罗、沙丁胺醇、妥布特罗、特布它林、福莫特罗、莱克多巴胺、苯乙醇胺A7种β-受体激动剂类残留量的高效液相色谱－质谱/质谱测定 质谱条件 离子化模式：电喷雾电离正离子模式ESI+ 干燥气温度350℃、 干燥气流速10L/min； 雾化器压力：35psi 毛细管电压：2500V 质谱扫描方式：多反应离子检测模式 色谱条件 色谱柱:安捷伦ZORBAX Eclipse plus C18柱2.1×100mm 3.5- micron） 流动相：甲醇-0.1%甲酸水梯度洗脱 流速:0.3ml/min。 柱温：40℃ 进样量：10μL 质谱参数 样品提取过程 试剂：pH5.2乙酸—乙酸钠缓冲液:称取3.0gNaAc·3H2O乙酸钠和约2.5mL冰乙酸，加水溶解并定容到1000mL水中。 称取5.0g（精确到0.01g）样品，于50mL离心管中，分别加入500μL 0.01mg/L内标液，混匀，静置10min，加入10mL pH5.2乙酸钠-乙酸缓冲溶液，混匀，加入100μL β-葡萄糖醛苷酶，37℃酶解16小时后取出冷却，超声振荡15min。4℃10000r/min离心10min。倾出上清液，收集。残渣再用10mL pH5.2乙酸钠-乙酸缓冲溶液提取一次，4℃10000r/min离心10min合并上清液。再离心，合并上清液过PCX固相萃取柱。 净化流程图 定容液的选择 结果分析（0.5-5.0ppb） 基质加标2.0ppb 线性范围0.5-5.0ppb 注意事项 酶解的必要性 安捷伦PCX淋洗和洗脱条件 保证氨水的纯度！！！！（尽量选择新购试剂） 定容液中甲醇的比例（甲醇控制在10%以内） 基质样品的必要性 动物性食品中硝基呋喃及其代谢产物残留量检测 背景 硝基呋喃类药物是人工合成的具有5-硝基呋喃基本结构的广谱抗菌药。对多数革兰氏阳性菌，革兰氏阴性菌具有较强的抗菌作用。主要适用于肠道细菌感染及原虫病。低浓度抑菌高浓度杀菌 几乎不溶于水和乙醇，但遇碱可分解，遇光颜色逐渐变深，应避光密封保存 限量要求 1993年美国禁止呋喃唑酮作为兽药使用。 2002 年美国全面禁止将硝基呋喃类药物用于食源性动物。 日本2006年5月实施肯定列表：不得检出 欧盟96/23/EC：