柑橘类病毒CVd-Ⅲ的检测及鉴定.pdfVIP

植物病理学报 ACTAPHYTOPATHOLOGICA SINICA 39(2)：207-211(2009) 柑橘类病毒 CVd一Ⅲ的检测及鉴定 马先锋 ，李 芳 ，-，胡春华。，韩 健 ，戴素明 ，曾柏全 ，邓子牛 (湖南农业大学园艺园林学院，长沙 410128；。国家柑橘改 良中心长沙分中心，长沙 410128； 。广东农业科学院果树研究所，广州 510640；湖南农业科学院园艺研究所，长沙 410125； 中南林业科技大学生命科学院，长沙 410004) Detectionandldentificationofcitrusviroid一111 MAXian．feng ，LIFang ，HU Chun-hua3， HAN Jina ，DAISu．ming’，ZENG Bai-quna ，DENG Zi—niu’ (HorticultureandLandscapeCollege，HunanAg— riculutralUniversity，Chnagsha410128，China；。NationalCenterforCitrusImprovement—Chnagsha，Chnagsha410128，China； 。InstiutteofFruitTreeResearch，GunagdongAcademyofAgriculutralScience，Guangzhou510640，China； InstiutteofHorti- cultureHunna AcademyofAgriculturalScience，Changsha410125，China； CoUegeofLifeScience，CentralSouthForestry University，Chnagsha410004，China) Abstract：TotalRNA wasisolatedfrom phloem ofyoungshootsnadretro-trna scfiptedtocDNA byRT-PCR (ReverseTrnascriptasePolymeraseChainReaction)withspecificprimerpairofCVd—HI(citrusviroid—HI)， theresultsofmoleculardetectionindicatedthathteCVd一111specificbnads，about300bp，weredetectedin27 ofhte49samplescollectedrfom differentcountiesinHunna Provinceandlsma plepresentedbyCataniaUni- versity．Allhtema plifiedcDNA rfagmentswereclonedna dsequences，sequencenaalysiscompraed wiht the reportedCVd·111sequencesinGenBankshowedthat：sequencesof21sma pleswerehtesamenadcompletely identicalwihtCVd-llIb(AF184147)；however，thesqeuencesofhteother6smaplesnadpresentedsample werediversifiedfrom tl1ereportedCVd一11IsqeuencesinGenBank． Keywords：citrus；viroid；CVd—I!I；RT—PCR；sequencenaalysis 文章编号：0412-0914(2009)02-0207-05 类病毒是迄今为止 已知的能引起植物病害的 橘类病毒 CVd—IV(CitursviriodIV)和柑橘类病毒 最小致病因子，为单链环状 RNA，大小为246～475 CVd—os(Citrusviriodos)。有的类病毒又可分为 nt，不编码任何蛋 白，但是，类病毒利用其特殊的结 多个亚型，如柑橘类病毒 CVd．111分为多个序列亚 构能在寄主编码蛋 白内自行复制H。1998年， 型：CVd．IIIa、CVd一11Ib、CVd．11Ib(Australia)、CVd— Flores等 报道 了20多种不同的类病毒类型，其