瞬时表达比较2种不同的RNAi载体的干涉效果.pdfVIP

植物病理学报 ACTAPHYTOPATHOLOGICA SINICA 40(5)：543—547(2010) ∈ ∈ e ∈ ∈ ‘∈ ∈ 8研究简报 8 {}} 三 3 } 3 {}：}{r 瞬时表达 比较 2种不 同的 RNAi载体 的干涉效果 邱 初 ，陶 刚 一，邱又彬 ，李奇科 一，朱 英 ，迟胜起 ，刘作易。 (贵州大学生命科学 院，贵阳 550025；贵州省农 、I生物技术重点实验室 ， lIH550006； 贵J+l省植物保护研究所 ，贵阳 550006； 贵州省 物技术研究所 ，贵 阳 550006； 青岛农业人学植物保护学院，青岛 266109) CornparisionofresistancetoPotatovirus PVY)oftwodi仟erentRNAivectorsvia transientexpression QIU Reng ，TAO Gang ，QIU You—bin一，LIQi—ke一，ZHU Ying ， CHISheng—qi，LIU Zuo—yi (CollegeofLifeScience，GuizhouUniversity，Guiyang550025，China；TheKeyLabora— tory forAgriculturalBiotechnology ofGuizhou，Guiyang 550006，China； Guizhou Institute ofPlantProtection，Guiyang 550006，China；GuizhouInstituteofBiotechnology，Guiyang550006，China；PlantProtectionCollege，QingdaoAgricultural University，Qingdao266109，China) Abstract：RNAiwithnaturaldefencemechanism ofhomologousRNA degradationiswidelyusedinresearch ofantiviralplant．ItisimportanttOconstructahighlyefficentRNAivectorfortransgenicplantsofviursresis— tance．Inthisstudy，partfragmentsofcoatproteingeneofPomtovirusY (PVY)(451—750bp)wereinserted intothetwoexpressionvectors．VectorpROKY300withoutintron andpHelY300withPDK andCAT introns onthehpRNA stem wereconstructed．Thesilenceefficiencyofvirusresistanceofthetwovectorswasinvesti— gatedas88％(22／25)ofrpROKY300and92％(23／25)ofrpHelY300throughtransientexpressionmediated byagroinfiltration．Theresultsshowed thatboth vectorswerehighly antiviralandelucidated thevalidity of RNAi—medicatesresistancetoviur s． Keywords：RNAi；agroinfiltration；transientexpression；PVY；CP 文章编号：0412—0914(2010)05—0543-05 马铃薯 Y病毒 (PotatovirusY，PVY)可以感 1 材料与方法 染马铃薯 、番茄 、辣椒 、烟草等植物。马铃薯感染 PVY，一般减产 50％左右，但 当PVY与 PVX或 1．1 材料 PVA复合侵染时，可使马铃薯减产达到80％以上 。 1．1．1 菌种和质粒 大肠杆菌 DH5c~、农杆菌 利用基天{I工程手段进行抗病毒研究是近年来的一 LBA4404菌株本实验室保存 ；pROK1I载体来 自青 个热点