谷斑皮蠹分子检测方法.pdfVIP

01o年第l期 植物捡疫 PLANTQUARANTINE 豆科技，2009，(1)：6，16． 技 ，2008，(5)：58． 8 张东辉，梁青 ，李杰刚．河南省大豆主要病害及防治．河南农业 11 丁俊杰 ．黑龙江省大豆主要病害研究进展．中国农学通报 ， 科学，2002，(7)：26～27． 2003，19(1)：75～80． 9 张东辉 ，梁青．河南省大豆主要病害及防治技术．大豆通报 ， 12 张淑珍，等．黑龙江省2004年大豆田病害的分布及防治．大豆 20o3，(3)：I9． 通报，2004，(5)：2～3． 10 汤怀升．大豆霜霉病的识别与综合防治技术．中国农村小康科 谷斑皮蠹分子检测方法 陈岩 朱水芳 陈 克 (中囤检验检疫科学研究院 北京 100029) A molecularidentificationofTrogodermagranarium basedon partialCOIgene．ChenYan，ZhuShuifang， ChenKe(ChineseAcademyofInspectionandQuarantine，Beijing100029，china) ‘ Abstract UsingpartialDNA sequencedatafrom mitochondrialCOIgenesofthegenusofTrogoderma，wedesign apairofspeciesspecificprimerstoamplifysequenceofinterest．TheresultssuggestedthatonlysamplesofTrogo- dermagranarium wasdetectedsuccessfully，whileotherspeciesofTrogodermawerenotdone． Keywords Trogodermagranarium．COIgene．moleculardetection 摘要 根据Simon(1994)发表的COI基因的通用引物，扩增了谷斑皮蠹、黑斑皮蠹、条斑皮蠹和花斑皮 蠹不同地理种群的COl基因片段。经序列比对后，依据多态位点，设计了检测谷斑皮蠹的特异引物。PCR 结果表明：引物可成功扩增出谷斑皮蠹样品的基因片段。而其他斑皮蠹属种类基因片段不能被扩增。 关键词 谷斑皮蠹；COI基因；分子检测 中图分类号 $379．5，$41—30 谷斑皮蠹 (TrogodermagranariumEverts)隶属 计了特异的引物，可将谷斑皮蠹与斑皮蠹属其他常 于皮蠹科 (Dermestidae)斑皮蠹属(Trogoderma)，是 见种类 (主要是黑斑皮蠹)区别开 。 我国检疫性有害生物，也是国际上重要的检疫性仓 1 材料与方法 储害虫之一。谷斑皮蠹危害多种植物性产品，主要 1．1 取样 以幼虫取食危害。除谷斑皮蠹之外，斑皮蠹属 中其 总共选取谷斑皮蠹、黑斑皮蠹、花斑皮蠹和条 他 几个种的危害也很大，如：黑斑皮蠹 (Trogoderma 斑皮蠹9个种群为研究对象。只选取来 自同一地 glabrum (Herbst))、花斑皮蠹 (Trogodermavariabile 点，至少有两个个体的同种标本提取基因组 DNA0 (Ballion))和条 斑 皮 蠹 (Trogoderma teukton 其中一头标本用于分子生物学实验，其余个体作为 Bea1)等 ¨。 形态鉴定参考。所有实验样品由中国检科院张生 斑皮蠹属的种类 由于个体小、种类多、种 内变 芳研究员鉴定，参考标本保存于中国检验检疫科学 异大，形态鉴定工作十分困难 。成虫的鉴定主要依 研究院动植检所。样品 1～2号：黑斑皮蠹(美 国)； 据触角、颏、腹部第9、10体节及外生殖器，雌虫的 样品3～4号