进口油菜籽中十字花科小球腔菌检测方法概述.pdfVIP

2010年第 1期 植物检疫 PLANTQUARANTINE 进 口油菜籽 中十字花科小球腔菌检测方法概述 吴翠萍 陈贯源。 李 彬 粟寒 郑斯竹 季健清 吴新华 安榆林 (1．江苏出入境检验检疫局 江苏南京 210001；2．南京林业大学) 摘要 十字花科小球腔菌(Leptosphaeriamaculans)是影响油菜生产的重要病原真菌，主要分布在加拿 大、澳大利亚、美国等油菜主产区。我国尚无此病原危害的报道。该病原通过带菌种子作远距离传播传入 新发病区，加强该病原菌的检测是防范该有害生物传入的重要手段。本文对该病原菌的现有检测鉴定方 法进行了综述，为 口岸部 门开展该病原菌的检测 以及制定相应检测方法标准提供借鉴。 关键词 油菜籽 ；十字花科小球腔菌；检测方法 中图分类号 S435．654，S41—30 十字花科小球腔菌 (Leptosphaeriamaculans)， 强，造成的损失大，在我国没有分布，而在其他油菜 又称油菜茎溃疡或油菜黑胫病 ，是世界范围内广泛 主产国有分布，习惯上又称为 A型种或强致病力 存在的一种真菌性病害，寄主范围广泛，主要是一 种；L．biglobosa致病力弱，造成的损失小，在我国有 些十字花科的作物，如油菜，甘蓝，大 白菜等，它可 分布，习惯上又称为B型种或弱致病力种 。这两种 造成幼苗的死亡，倒伏或者植株的早衰。迄今为 菌无性世代属于茎点霉属(Phomaspp．)，至于两种 止，世界上大部分国家都有分布，严重危害着大田 是否是同一个种尚未得到确认 J。因而，对于该病 作物油菜籽的产量 ，尤其是在澳大利亚、欧洲及北 原菌的准确鉴定，最关键是区分两种病原菌。 美等世界主要的油菜产区，每年由于该病原菌造成 2 检测方法 的损失超过9亿美元…。我国目前尚无该病原菌 文献资料表明，根据A型种与B型种在寄主上 的分布，是我国进境植物检疫性有害生物。 引起的症状 、培养特性、分生孢子萌发产生芽管的 中国是油料作物产品进 口大国，近几年油菜籽 长度、同工酶谱分析、次级代谢产物分析、血清学方 进 口量居世界第一，该病菌有可能随带菌种子进 口 法 、分子生物学方法 (核型、RFLP、RAPD、REP— 而传人我国。从病菌的远距离传播来看，种子是该 PCR、特异性引物 PCR、SCAR标记、ITS序列)等方 病原菌传人新发生区的重要途径l2J。种子的带菌 法能够将两型区分开 J。但是，从适合 口岸简便、 率通常为0．1％ ～5％，由此导致 田间植株发病率为 准确、快速、灵敏的检测要求的角度，培养特性的差 0．1％～19％，换算成种传发病率为 100％～380％， 异以及特异性引物 PCR检测方法是行之有效的区 可见带菌种子传人该病原菌的风险很大 ]。但是 分方法 。 我国每年需要引进大量油菜籽来满足国内市场 的 2．1 培养性状的差异 需求，进 口份额达到了近 60％，可 以说我 国正面临 L．mac~lan$和 L．biglobosa两种菌 的有性阶段 着该病原菌入侵和传人的前所未有的考验。因而， 一 般是在油菜植株的残体上产生，在培养条件下只 确保该病原菌从油菜籽中准确检出，以此与进 口国 产生形态特征基本相 同的无性阶段的分生孢子器 商谈、交涉有关进 口条件，是避免该病原菌传人、保 和分生孢子 。 护国内油菜籽产业安全的唯一途径。为此，本文就 关于该两种菌的培养特性区别主要在于在标 目前从油菜籽中检测该病菌的检测方法进行综述 。 准化的培养条件下 (培养基类型与成份、时间、光 1 病原 照)，菌株的生长速度、气生菌丝疏密程度、菌落边