‘秦冠’苹果MdWRKY基因亚细胞定位及原核表达.pdfVIP

园 艺 学 报 2011，38（7）：1341–1348 http: // www. ahs. ac. cn Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com ‘秦冠’苹果MdWRKY 基因亚细胞定位及原核 表达 1,2 1 1 1 1,2 1,2 1,2,* 高 华 ，樊红科，党志国，王 飞 ，王雷存 ，刘振中 ，赵政阳 1 2 （西北农林科技大学园艺学院，陕西杨凌 712100 ； 陕西省苹果工程技术研究中心，陕西杨凌 712100 ） 摘 要：以‘秦冠’苹果为试材，采用RT-PCR 方法获得了一个 WRKY 基因，全长 1 224 bp，推断 其编码 331 个氨基酸，命名为 MdWRKY 。亚细胞定位分析MdWRKY 蛋白分布在细胞核内，属于核蛋白。 实时定量分析结果显示，MdWRKY 基因受苹果斑点落叶病菌的诱导，表明其可能参与植物与病原菌的互 作。随后进行原核表达分析，SDS/PAGE 电泳结果表明表达蛋白与其蛋白大小一致。 关键词：苹果；转录因子；克隆；亚细胞定位；表达 中图分类号：S 661.1 文献标识码：A 文章编号：0513-353X （2011 ）07-1341-08 Studies on Subcellular Localization and Expression in E.coli of MdWRKY from ‘Qinguan ’Apple 1,2 1 1 1 1,2 1,2 GAO Hua ，FAN Hong-ke ，DANG Zhi-guo ，WANG Fei ，WANG Lei-cun ，LIU Zhen-zhong ， and ZHAO Zheng-yang1,2,* 1 2 （College of Horticulture，Northwest A F University ，Yangling，Shaanxi 712100 ，China；Apple E T Research Centre of Shaanxi Province，Yangling，Shaanxi 712100，China ） Abstract ：A WRKY gene ，designated as MdWRKY ，was isolated from ‘Qinguan ’apple leaves using reverse transcription PCR approaches. MdWRKY was 1 224 bp and encoded a 331 amino-acid protein. Analysis of subcellular localization indicated that MdWRKY protein was targeted to the nucleus. Quantitative RT-PCR analysis showed that MdWRKY transcription was induced by Alternaria alternata f sp. mali indicating that MdWRKY gene may be involved in the interaction between plant and pathogen. Then expression in