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第八章 发酵动力学 1、定义： 研究发酵过程中的菌体生长、基质消耗、产物生成的动态平衡及其内在规律。 2、研究内容： 1）微生物生长过程中的质量与能量平衡； 2）发酵过程中菌体生长速率、基质消耗速率与产物生成速率的关系； 3）环境因素对上述三者的影响。 3、研究目的：最佳工艺条件。 第一节 微生物生长代谢过程中 的质量平衡 一、微生物生长代谢过程的碳平衡 1.最低培养基与完全培养基：图8-1和图8-2 最低培养基:由单一碳源葡萄糖与无机盐组成，葡萄糖既是能源，又是构成菌体的材料； 完全培养基：由葡萄糖、无机盐等组成，还有酵母浸膏、蛋白胨等。 2.微生物生长代谢过程中基质和产物之间的碳元素平衡 微生物的元素组成：表8-1 这些元素来源于培养基，因此，基质中的碳元素变成菌体、产物、二氧化碳中的碳元素。基质中碳元素的消耗速度与微生物生长速度、代谢产物的生成速度、二氧化碳的生成速度有关。 式中S为基质，X为菌体，P为产物 a1为每mol基质中的含碳量，a2为每g干菌体内的含碳量， a3为每mol二氧化碳内的含碳量， a4为每mol产物内的含碳量。 3.微生物生长过程中的碳源平衡： 在微生物反应中，碳源的用途主要消耗于： ①满足菌体生长消耗，用 表示； ②维持微生物生存的消耗，用 表示； ③合成代谢产物的消耗，用 表示。 则有： 因此，在以菌体为目的的发酵中，发酵过程中基质葡萄糖消耗速度与菌体生成量成正比，如图8-3。 4.细胞物质生产中碳源的化学平衡 自然界的一切变化过程都存在着变化前后的质量和能量平衡，发酵过程也不例外。通过研究微生物反应的化学平衡，可帮助我们预测发酵过程中各种基质的需要量，从而更经济、有效地使用它们，减少无效消耗。 为减少问题的复杂性，我们在研究发酵过程的化学计量式时，可作如下的处理： ①对复杂分子组成的原料用简化的化学式表示,如菌体化学组成表示为CH1.64O0.52N0.16 。 ②忽略反应中的一些次要的元素和成分，如P,Ca等。 菌体的生长一般是在供氧条件下，将营养基质转化成菌体成分、CO2和H2O的过程。因此，如果菌体的化学组成和基质到菌体的最大转化率已经知道时，就可以列出微生物生长的化学计量式。 如青霉菌以葡萄糖为基质，通气培养，其菌体化学组成为CH1.64O0.52N0.16、葡萄糖至菌体的转化率为0.48g干菌体/g葡萄糖，则可对下式进行配平。步骤如下： ①写出反应化学简式。 C6H12O6+NH3+O2→CH1.64O0.52N0.16+CO2+H2O ②根据转化率配系数。 C6H12O6的摩尔质量为180；菌体CH1.64O0.52N0.16摩尔质量为24.2（12+1.64+16×0.52+14×0.16） 已知葡萄糖至菌体的转化率为0.48g干菌体/g葡萄糖，则以1摩尔葡萄糖为基准，生成菌体的量为180×0.48=86.4g，那么，菌体的摩尔数为：86.4÷24.2=3.57 ③通过质量平衡，配平其他成分的系数，最后得到的计量方程式。 C6H12O6+0.57NH3+2.33O2 → 3.57CH1.64O0.52N0.16+2.43CO2+3.93H2O 5.对微生物生长过程进行碳平衡的意义 1）碳源的利用情况和碳源的转化率是一项重要的经济指标； 2）碳平衡的方程式是发酵过程基质消耗的重要计量方程； 3）对于以菌体为目的的发酵，碳平衡方程可计算出微生物菌体的生成速度。 二、微生物生长代谢过程中的ATP循环与氧平衡 1.ATP循环 微生物生长代谢过程中的ATP循环示意图： 合成代谢 ATP 分解代谢 ADP 维持代谢 2.生物氧化 1mol葡萄糖彻底氧化生成38molATP 3.微生物代谢过程中的氧平衡 假定发酵是在充分供氧的条件下进行，即所消耗的基质除一部分被同化到菌体和产物外，其余全部被氧化生成CO2和H2O，则由能量守恒定律可得氧元素的平衡式： 微生物代谢过程中基质完全氧化的耗氧量ΔS，包括菌体、代谢产物完全氧化耗氧量ΔX 、ΔP，和微生物生长过程中的耗氧量ΔO2三部分，A，B，C是系数。 4.ATP消耗对菌体得率YATP与ATP平衡 能量通过高能磷酸键贮存、转运。 在供氧充分时，三羧酸循环中间代谢产物被脱