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园 艺 学 报 2013 ，40 （1）：32 –40 http: // www. ahs. ac. cn
Acta Horticulturae Sinica E-mail: yuanyixuebao@126.com
平榛脱水素基因的克隆与表达分析
1,2 2 2 2 1 2,*
陈 新 ，梁丽松 ，马庆华 ，赵天田 ，刘庆忠 ，王贵禧
1 2
（山东省果树研究所，山东泰安 271000 ； 中国林业科学研究院林业研究所，林木遗传育种国家重点实验室，北京
100091）
摘 要：以平榛（Corylus heterophylla Fisch. ）花芽为试材，采用RT-PCR 和 RACE 方法克隆了一个
平榛与脱水素基因同源的 cDNA 基因，命名为 ChDHN （GenBank 登录号 HM228389 ），其全长 639 bp，
具有一个 504 bp 的潜在编码区，编码 167 个氨基酸组成的多肽，具有 LEA 类家族成员具有的特征多肽序
列，属于 Y SK 类型 DHN 基因，预测 ChDHN 蛋白质分子量 18.03 kD，预测其理论等电点为 7.28 。对
4 2
ChDHN 的时空表达特性进行了研究，以Actin 为内参，对 ChDHN 在 4 ℃冷激条件下（0、2 、4 、8、24
和 48 h ）的表达模式进行了初步的研究，冷激处理后 ChDHN 表现逐渐上调的表达趋势，24 h 达到最大表
达量，48 h 表达量降低；推测 ChDHN 属于植物冷适应调节网络中的应答基因；定量 RT-PCR 分析 ChDHN
在不同器官中的表达，在种子中高丰度表达，其次是雄花序和花芽，在树皮中表达最低。用 PCR 、酶切
和测序鉴定等方法检测已成功构建重组表达载体 pET-32a(+)-DHN ，将鉴定完全正确的重组质粒转化大肠
杆菌 BL21(DE3) ，经 SDS分析并经过 Western blotting 鉴定，表明重组蛋白被 IPTG 诱导后高效表
达出一条比预测分子量 18.03 kD 大 4 kD 的融合蛋白。
关键词：平榛；ChDHN；qRT-PCR ；原核表达
中图分类号：S 664.4 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2013 ）01-0032-09
Cloning and Expression Characteristics of a Novel Dehydrin Gene from
Hazelnut （Corylus heterophylla Fisch. ）
1,2 2 2 2 1 2,*
CHEN Xin ，LIANG Li-song ，MA Qing-hua ，ZHAO Tian-tian ，LIU Qing-zhong ，and WANG Gui-xi
1 2
（Shandong Institute of Pomology ，Tai’an，Shandong 271000 ，China； State Key Laboratory of Tree Genetics and
Breeding ，Research Institute of Forestry ，
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