高压对小球藻生长与其酶活性的影响.pdf

高压对小球藻生长及其酶活性的影响1 1 1 1 2 1 陈岩 ，蒋洁 ，郑文杰 ，徐世平 ，杨芳 1.暨南大学化学系，广东广州（510632 ） 2. 中国科学院广州地球化学研究所，广东广州（510640 ） E-mail ：tzhwj@ 摘 要：试图通过高压的特殊生物影响诱变产生大个体或其它性状优良的小球藻变异体， 考察了不同的压力剂量处理后小球藻的形态变化、生长情况及藻体内的抗氧化酶体系的酶 活性变化情况。实验结果表明，80MPa 压力对小球藻的没有显著的致死效应，300MPa 压 力处理1 h 能够导致小球藻的大量死亡，少量存活的藻细胞经过5 d 的“停滞期”后开始正常 生长，存活的小球藻的个体大小变化 10 ％。80 MPa 的压力下处理2 h 、6 h、12 h 后小球 藻的初期的生长速度明显加快，而到生长末期小球藻生长开始趋于平缓。小球藻干质量为 12 h 实验组最大，而单位蛋白含量随着干质量的增加而下降，几种抗氧化酶活性为6h 实验 组具有最大活性。经过300 MPa 压力预处理 1 h 后的小球藻再在80 MPa 压力下进行处理， 发现小球藻干质量为2 h 再处理实验组最大，蛋白含量为6 h 再处理实验组最高，抗氧化酶 的活性随着压力处理时间的增加而下降。 关键词：高压；小球藻；形态；抗氧化酶；生长曲线 中图分类号:Q945.78 文献标识码：A 引言 压力作为一个重要的物理学参数，和温度一样都是物理学的研究范畴。由于压力能够 改变生物体系的体积，并由此产生生物学影响，因此高压生物学研究已经引起越来越多的 生物学和生物工程研究者的兴趣[1-2] 。关于压力是否会对活体生物产生影响的报道迄今尚 少。最具代表性的是关于高静水压的状态下的鱼的研究，如Philippe [3]通过对深海中鱼的研 究发现，随着深度的增加，鱼中蛋白酶的活力降低，耗氧减少，脂质的流动性增加。近年 来徐世平等[4-6]发表了关于高压对水稻生长发育的研究，发现高压不仅使水稻的生长周期、 成穗与产量、叶绿素含量和抗性有所改变，还使水稻产生变异，其中一种变异水稻表现为 植株较高，谷粒长宽较大，DNA分析结果表明高静水压处理可以产生DNA变异。 小球藻作为一种单细胞真核微生物，其直径一般为5～10 µm ，含有丰富的蛋白质、氨 基酸、亚麻酸、亚油酸、胡萝卜素以及抗氧化酶，具有极其丰富均衡的营养成分和医疗保 健价值[7] 。目前主要作为一种营养丰富的保健食品来进行工业化生产。由于小球藻的个体 体积太小，目前的工业生产中只能采用离心法进行采收。如果能够通过对小球藻进行高压 诱变，产生大尺寸或其它性状优良的小球藻变异体，获取变异株系，这将对微藻产业具有 重大意义。 1. 材料与方法 1.1 试验材料 小球藻 （Chlorella Vulgaris，C.Vulgaris ）由暨南大学水生研究所提供，本实验室保种。 1.2 实验 1.2.1 培养 1本课题得到广东省自然科学基金重点项目）和广东省自然科学基金团队项目 （039213 ）的资 助。 -1- 实验容器250 ml三角瓶，培养体积150 ml，培养温度30℃，光照周期12 h ：12 h，光照 强度4000lx，将高压处理过的小球藻与对照组的初始培养密度调为OD540为0.1～0.2，置于 光照培养箱中静置培养。每天定时摇匀3 次。 1.2.2 高压处理方法 （1）加压方法：待培养箱中培养的小球藻的光密度OD540达到 1.0 后，取出少量用封口 袋密封，置于高压容器中，以水为传压介质，室温下进行加压处理。 （2 ）高压对小球藻的预处理：将培养箱中处于对数生长期的小球藻在300 MPa 的压力 处理1 h后，调节OD540为0.1~0.2 后在光照培养箱中培养，