重庆辣椒上番茄斑萎病毒的血清学检测及分子鉴定.PDFVIP

园艺学报，2017 ，44 (3) ：487 –494. Acta Horticulturae Sinica doi ：10.16420/j.issn.0513-353x.2016-0733；http ：//www. ahs. ac. cn 487 重庆辣椒上番茄斑萎病毒的血清学检测及分子 鉴定 1 1 1 1 1 2 3 孙 淼 ，荆陈沉 ，楚成茹 ，吴根土 ，孙现超 ，谢 艳 ，刘 勇 ， 青 玲1,* 1 2 3 （西南大学植物保护学院，重庆 400716 ； 浙江大学农业与生物技术学院，杭州 310058 ； 湖南省植物保护研究所， 长沙 410125 ） 摘 要：为明确重庆地区辣椒上番茄斑萎病毒（Tomato spotted wilt virus，TSWV ）的发生情况及其外 壳蛋白基因（cp ）序列变异特征，采用斑点免疫杂交法（Dot-ELISA ）和反转录 PCR （RT-PCR ）技术对 采自重庆的 298 份辣椒病毒病样品进行了检测和分子鉴定。Dot-ELISA 检测结果表明，有 40 份辣椒样品 检测到 TSWV ，检出率为 13.42%。通过电子显微镜在TSWV 检测呈阳性的样品中观察到具包膜的球状病 毒粒体。设计扩增 TSWV cp 的引物，选取 6 个 TSWV 阳性样品进行RT-PCR 扩增，均扩增到大小约 750 bp 的目的片段。序列分析表明，重庆辣椒分离物 TSWV-CQ （KX611497 ）与已报道的 22 个 TSWV 分离物 cp 基因的核苷酸相似性为 96.1% ~ 99.4%，与已报道的 TSWV 中国分离物亲缘关系较近，表现出明显的 地理相关性。 关键词：辣椒；番茄斑萎病毒；Dot-ELISA ；RT-PCR 中图分类号：S 641.3 文献标志码：A 文章编号：0513-353X （2017 ）03-0487-08 Serological Detection and Molecular Identification of Tomato spotted wilt virus in Pepper in Chongqing 1 1 1 1 1 2 3 SUN Miao ，JING Chenchen ，CHU Chengru ，WU Gentu ，SUN Xianchao ，XIE Yan ，LIU Yong ， and QING Ling1,* 1 2 （College of Plant Protection ，Southwest University ，Chongqing 400716 ，China ； College of Agriculture and 3 Biotechnology ，Zhejiang University ，Hangzhou 310058 ，China；Institute of Plant Protection ，Hunan Province ，Changsha 410125 ，China ） Abstract ：To identify the occurrence and variation of the coat p