赛默飞世尔科技超微量紫外可见光分光光度计.PDFVIP

赛默飞世尔科技超微量紫外可见光分光光度计NanoDrop 应用 NanoDrop 在核酸的质控中的应用 简介 NanoDrop 的样品测量速度非常快。NanoDrop 2000c 的每样品检 定量 已经成为分子生物学和临床诊断的基本技术 以前 相关 测时间不足 秒 在需要更高通量的情况下 最 PCR 。 ， 5 ， ，NanoDrop 8000 报告很少或没有实现标准化 因此实验经常无法重复 此外 许多 多可同时测量 个样品 时间仅为 秒 软件可显示对每个样品 ， 。 ， 8 ， 20 。 技术所依赖的假设 特别是与内参基因稳定性和扩增效率相关的假 计算出的 浓度 核酸纯度比和光谱图的全部信息 ， DNA 、 。 设 实际上通常是无效的 为了使实验得到更好地设计和恰当地验 ， 。 为何定量如此重要？ 证并使实验报告包含足够的实验重复信息 关于实时定量 实验 ， PCR 使用标准曲线进行绝对定量时 样品必须在标准曲线范围内 如图 ， 。 发表需要满足的最低要求实验信息量 即 指南 得到了提议。 ( MIQE ) 所示 标准曲线为线性 但是这一趋势不是可以无限延伸的 一 1 ， ， 。 本应用说明详述了核酸质量评估相关的 指南 尤其是使用 MIQE ， 旦模板浓度超过 反应的限值 扩增效率将会降低 定量的线 PCR ， ， Thermo Scientific NanoDrop 紫外可见分光光度计所做的核酸定量和 性下降 而模板浓度过低时 背景污染物可能被误认为是扩增信号 。 ， ， 纯度评估。 信噪比不足 同时 将标准曲线外推至更大范围也是具有风险的 。 ， ， 指南 所以 在进行 前最好确认样品在合适的浓度范围内 MIQE ， qPCR 。 指南与用于芯片实验的 指南大体相同 指南的基本原 MIQE MIAME 。 则是提供全面的方法以评估方案的有效性 结果是否正确解析以及