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动物实验设计与实施 实验动物常用的采血方法 尾尖采血：常用于大小鼠，小量采血。可以多次采血。 眼眶静脉丛采血：常用于大小鼠、沙鼠的采血。 摘眼球采血:血量较多，常用于大小鼠、沙鼠 腹主动脉采血：常用于大小鼠、沙鼠， 心脏采血： 兔耳缘静脉或耳中动脉、颈动脉采血 犬：在前肢静脉、后肢小隐静脉采血 猴：可在指尖、足跟、后肢皮下静脉、颈静脉采血 猪：小型猪为耳大静脉、后肢静脉 实验动物各种采血方法的采血量 一、小、大鼠 1、剪尾采血 此法每鼠可采10次以上。 小鼠每次0.1ml。 大鼠每次0.4ml。 2、眼眶后静脉丛采血 小鼠每次0.2-0.3ml 大鼠每次0.5ml 2、股动脉采血 小鼠每次0.5ml 小鼠每次0.5ml 常用实验动物的最大安全采血量与最小致死采血量 采集体液 胸水的采集 腹水的采集 消化液的采集 尿液的采集 骨髓液的采集 动物精液的采集 乳汁的采集 尿液的采集 代谢笼法：此法较常用于大、小鼠：成熟小鼠尿量1-3ml/24h，大鼠为55-75ml/24h 导尿法：常用于雄兔、犬等动物，要轻度麻醉，可以采到无污染的尿液。 压迫膀胱法：此法适用于兔、猫、犬等大动物。 输尿管插管法 膀胱插管法 膀胱穿刺法 剖腹采尿法 反射排尿法：适用于小鼠 病理取材基本要求 病理检查应分层次进行，先进行一般外观观察，然后剖检观察，再进行光镜详细检查。 通常选择正常与病变交界处组织，即包括病变本身及病变周围组织。 对照组动物相同器官取材时，选材部位应尽量一致。 肉眼看不到明显病变时，各试验组选取标本位置应一致。 所选组织应包括脏器全部层次结构或重要结构，如肾应包括皮质、髓质和肾盂。 体积大和分叶的器官，应视不同组织选取多个部位，小器官可整体取材并固定，如淋巴结、扁桃体、甲状腺等。 胃肠标本应将内容物冲洗掉，以免内容物影响组织的固定，产生自溶。 所取材料应尽量保持肉眼标本的完整性，不宜过厚或过薄，一般厚约3-5mm，大小为1.5-2cm。 切取组织时不要挤压，使用锋利刀具，少用剪刀，勿选用被器械钳压过的部位。 标本取材要熟练，尽可能快的完成整个过程，特别是易自溶的组织，如肠道、脑、腺体等。 剖检记录应客观、详细，用形象描述而不能用诊断的病名来代替。 同一实验中的对照组和实验组动物应交叉剖检，严格统一各种条件和操作，尽量避免各种可能的干扰因素。 实验动物常用的给药方法和途径 一、经口给药 自动口服给药： 灌胃给药: 二、注射给药： 皮下注射给药 皮内注射 肌肉注射给药 静脉注射给药 腹腔注射给药 脑内注射： 椎管内注射： 关节内注射： 淋巴囊注射：蛙类常采用此法 三、其他途径给药（吸入给药等） 人与实验动物之间药物剂量的换算 人与实验动物对同一药物的耐受性，动物比人大，即单位体重的用药量比人要大。 一般可按下列比例换算，每单位体重人的药量为1，则小鼠、大鼠为25-50，兔、豚鼠为15-20，狗、猫为5-10。 常用药物的最大给药量 常用麻醉药的剂量及注射途径 麻醉方法：全身麻醉和局部麻醉，通常通过吸入和注射（静脉、皮下、肌肉、腹腔）途径。 常用麻醉药物：乙醚（吸入），戊巴比妥钠、硫贲妥钠、氯胺酮（静脉），普鲁卡因、利多卡因（局麻） 麻醉注意事项 麻醉前应禁食8h以上 麻醉前应准确称体重 注意麻醉剂量 麻醉过程中注意观察动物的反应情况 注意保温 静脉注射时必须缓慢， 在寒冷冬季，麻醉剂在注射前应加热至动物体温水平 实验动物病原分类 A: 人畜共患病 B: 实验动物致死病原 C: 非致死但可引起实验动物发生疾病或生理功能改变 D: 条件致病菌 E: 非病原但可为反映实验动物微生物控制的指标 处理组 处理因素+非处理因素 处理效应+非处理效应 对照组 (无) 非处理因素 (无) 非处理效应 比较结果 处理因素 处理效应 排除“非处理因素”的影响，从而衬托出 “处理因素”的作用。 空白对照 对照组不施加任何处理因素。 特点：简单易行，但容易引起心理差异，从而影响实验效应的测定。只有在处理因素很强，非处理因素很弱的情况下使用。 安慰剂对照 安慰剂：无药理作用，其外观如剂型、大小、颜色、重量、气味及口味等与试验药物一致,不为受试动物所识别。 例如：以安慰剂为对照，研究使用艾拉莫德片对类风湿性关节炎的治疗效果。 目的：克服研究者、受试对象、评价者等由于心理因素所形成的偏倚；还可消除疾病自然进程的影响。 实验条件对照 对照组不施加处理因素，但施加某种与处理因素相同的实验条件。包括操作技术、被试因素溶媒或其他载体等。