解脂耶氏酵母脂肪酶Lip2的表面展示及其酶学性质.PDFVIP

微生物学通报 FEB 20, 2010, 37(2): 174−178 Microbiology China © 2010 by Institute of Microbiology, CAS tongbao@ 研究报告 解脂耶氏酵母脂肪酶Lip2 的表面展示 及其酶学性质 * 刘文山 赵鹤云 贾彬 徐莉 闫云君 (华中科技大学生命科学与技术学院 湖北 武汉 430074) 摘 要: 表面展示酶作为全细胞催化剂具备诸如能提高酶的稳定性、省去纯化过程、节约成本等优 点。脂肪酶是应用最为广泛的工业酶之一。本研究利用酿酒酵母细胞壁蛋白Cwp2 作为锚定蛋白, 将 解脂耶氏酵母脂肪酶 Lip2 展示在酿酒酵母细胞表面, 以制备脂肪酶全细胞催化剂。Lip2 被融合到 Cwp2 的N 端, Cwp2 通过其C 端的GPI 锚定信号共价结合到细胞壁上。表面展示的Lip2 可以水解 三丁酸甘油酯及对硝基苯酚辛酸酯(pNPC), 其pNPC 水解酶活达到4.6 U/g 干细胞。作为全细胞催化 剂, 表面展示的Lip2 具备良好的催化特征, 其最适温度为40°C, 最适pH 为8.0, 同时还具备良好的 有机溶剂稳定性。 关键词: 脂肪酶, 解脂耶氏酵母, 酿酒酵母, 表面展示, 全细胞催化剂 Cell Surface Display of Yarrowia lipolytica Lipase Lip2 by Saccharomyces cerevisiae and Its Practical Properties * LIU Wen-Shan ZHAO He-Yun JIA Bin XU Li YAN Yun-Jun (College of Life Science and Technology, Huazhong University of Science and Technology, Wuhan, Hubei 430074, China) Abstract: Surface display of enzymes has been employed to improve stability of enzymes, and further save tedious purification process of enzymes to be used in conventional immobilization. Lipase is widely applied in industry. In this study, we constructed a Saccharomyces cerevisiae strain displaying lipase Lip2 from Yarrowia lipolytica on the cell surface. The gene encoding mature Lip2 was fused with the genes encoding the Kre1p