中药复方“通脉口服液” 对肾小球系膜细胞增殖及分泌ＩＬ －１β的影响论文.docVIP

　　中药复方“通脉口服液” 对肾小球系膜细胞增殖及分泌ＩＬ －１β的影响论文 钟丹 杨霓芝 赵代鑫 刘明平 【摘要】 目的观察中药复方“通脉口服液”对体外培养条件下大鼠肾小球系膜细胞（ＭｓＣ）增殖和分泌ＩＬ －１β的影响。方法应用细胞培养技术进行肾小球系膜细胞的传代培养，采用血清药理学方法，制备通脉口服液含药血清、黄芪含药血清、三七含药血清，采用ＭＴＴ 法观察各组含药血清对正常培养条件下及ＬＰＳ 刺激状态下肾小球系膜细胞增殖的影响，ＥＬＩＳＡ 法测定ＬＰＳ 刺激下通脉口服液组细胞上清中ＩＬ －１β的含量。结果3组含药血清均可抑制大鼠肾小球系膜细胞的增殖，三组之间比较，通脉口服液组作用要优于黄芪组及三七组。ＥＬＩＳＡ 结果表明：通脉口服液含药血清可以抑制肾小球系膜细胞分泌ＩＬ －１β。结论中药复方“通脉口服液”可抑制肾小球系膜细胞的增殖及ＬＰＳ 诱导的系膜细胞ＩＬ －１β的产生，肾小球系膜细胞是通脉口服液防治慢性肾炎.freelethodsＧＭＣ ｗｅｒｅ ｃｕｌｔｕｒｅｄ ｗｉｔｈ ｉｎ vitro ｃｅｌｌ ｃｕｌｔｕｒｅ ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ．Ｓｅｒｕｍ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ Ｔｏｎｇｍａｉ Ｏｒａｌ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ（ＴＭ），Ｓｅｒｕｍ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ Ｈｕａｎｇｑｉ ａｎｄ Ｓｅｒｕｍ ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ Ｓａｎｑｉ ｗｅｒｅ ｐｒｅｐａｒｅｄ ｗｉｔｈ ｓｅｒｕｍ ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉ ｃａｌ ｍｅｔｈｏｄｓ．Ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｄｅｔｅｃｔｅｄ ｂｙ ｍｅｔｈｙｌｔｈｉａｚｏｌｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ （ＭＴＴ） ａｓｓａｙ ａｎｄ ＩＬ －１β ｌｅｖｅｌ ｂｙ ｅｎｚｙｍｅ －ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ（ＥＬＩＳＡ） ｗｅｒｅ uｓｅｄ ｔｏ ｅｖａｌｕａｔｅ ｔｈｅ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＴＭ －ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｓｅｒｕｍ ，Ｈｕａｎｇｑｉ －ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｓｅｒｕｍ ａｎｄ Ｓａｎｑｉ －ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｓｅｒｕｍ．ResultsＴＭ －ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｓｅｒｕｍ，Ｈｕａｎｇｑｉ －ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｓｅｒｕｍ ａｎｄ Ｓａｎｑｉ －ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｓｅｒｕｍ ｃｏｕｌｄ ｉｎｈｉbｉｔ ｔｈｅ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ｏｆ ｍｅｓａｎｇｉａｌ ｃｅｌｌ，ａｎｄ ｔｈｅ ｉｎｈｉｂｉｔｏｒｙ ｅｆｆｅｃｔ ｏｆ ＴＭ －ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｓｅｒｕｍ ｗａｓ ｓｔｒｏｎｇｅｒ．Ｐｒｏｔｅｉｎ ｏｆ ＩＬ －１β ｗａｓ ｉｎｃｒｅａｓｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｉｎ ｔｈｅ ｐｒｅｓｅｎｃｅ ｏｆ ＬＰＳ ａｎｄ ｔｈｉｓ ｉｎｃｒｅａｓｅ ｃｏｕｌｄ ｂｅ ｒｅｖｅｒｓｅｄ ｂｙ ＴＭ －ｃｏｎｔａｉｎｉｎｇ ｓｅｒｕｍ．ConclusionＴｈｅ ｇｌｏｍｅｒｕｌａｒ ｍｅｓａｎｇｉａｌ ｃｅｌｌ ｉｓ ｏｎｅ ｏｆ ｔｈｅ ｍａｉｎ ｔａｒｇｅｔ ｃｅｌｌｓ ｗｈｉｃｈ ｔｈｅ Ｔｏｎｇｍａｉ Ｏｒａｌ Ｓｏｌｕｔｉｏｎ ｂｒｉｎｇｓ ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃａｌ ａｃｔｉｏｎ ａｎｄ ｔｈｅ ｍｅｃｈａｎiｓｍｓ ｍａｙ ｂｅ ｒｅｌａｔｅｄ ｔｏ ｉｎｈｉｂｉｔｉｎｇ ｔｈｅ ｍｅｓａｎｇｉａｌ ｃｅｌｌ ｐｒｏｌｉｆｅｒａｔｉｏｎ ，ｄｅｃｒｅａｓｉｎｇ ｔｈｅ ＩＬ －１β ｓｅｃｒｅｔｉｏｎ，ａｎｄ ｂｌockｉｎｇ ｔｈｅ ｉｎｆｌａｍｍａｔｏｒｙ ａｃｔｉｏｎ ｉｎ ｍｅｓａｎｇｉａｌ ｒｅｇｉｏｎ． Key C增殖的影响（略） 与空白血清组比较，**P 0.01；与通脉口服液组比较，△P 0.05，△△P 0.01；与LPS通脉口服液组比较，▲▲P 0.01；n=6 ２．２ 通脉口服液对系膜细胞ＩＬ －１β蛋白分泌的影响结果见表２。结果显示,..毕业ＬＰＳ 组在不同时间段较空白对照组ＩＬ －１β产生量均明显增加，且有非常显著差异（P ＜０．０１），并在加入ＬＰＳ １２ｈ 时分泌量最多，但与其它时间点比较差异无显著性（P＞０．０５）。ＬＰＳ ＋通脉口服液组与ＬＰＳ 组在６，１２，２４ ｈ 比较ＩＬ －１β分泌量均下降，在６，１２ ｈ 两个时间点有非常显著性差异（P ＜０．０１），而２４ ｈ 时间点有显著性差异（P ＜０．０５）。在３ ｈ 时间点ＬＰＳ ＋通脉口服液组与ＬＰＳ 组比较ＩＬ －１β无明显差异。 表2 各组分在不同时段对大鼠系膜细胞IL-1β水平（略） 与空白对照组比较，*P 0.05，**P 0.01；与LPS比较，△△P 0.01；n=4 3 讨论 自1975年Fish 等［7］ 首次在体外培养中获得较纯肾小球系膜细胞（ＭＣ）以来，肾小球系膜细胞的体外培