二氧化氯对灵芝菌丝生长的影响论文.docVIP

　　二氧化氯对灵芝菌丝生长的影响论文 党建章,.freel Groa lucidum Abstract：ObjectiveTo explore the application of chlorine dioxide as antiseptic in cultivation and submerged cultural of Ganoderma lucidum.MethodsThe mycelium groa lucidum ined by plate culture method and biomass by submerged culture method. ResultsMycelium of Ganoderma lucidum gree close to the contrast edium perature. ConclusionThis provides a firm foundation for the cultivation and submerged culture of Ganoderma lucidum. Key a lucidum； Mycelium groa lucidum作为药用真菌其功效已家喻户晓。近年来灵芝作为保健食品和美容化妆品的添加剂，其应用日益广泛。传统方法栽培灵芝，培养料均要高温灭菌。笔者在筛选灵芝培养的消毒剂时，发现二氧化氯对各类微生物都有较强的杀灭和抑制作用，而且对人畜无害［1］.freela.lucidum）AS. 565，由本系提供。美国灵芝、日本灵芝、惠州灵芝、信州灵芝、紫芝、黑芝均购自山东金乡真菌研究所。杨树菇、云芝、茯苓、茶新菇、金针菇均购自华中农业大学。霉菌（黑曲霉、根霉、青霉），细菌（大肠杆菌、枯草杆菌）由本系提供。 1.2 斜面培养基（%）马铃薯（去皮）20；葡萄糖 2；KH2PO4 0.3；MgSO4 7H2O 0.15；琼脂 2；pH6.5。 1.3 摇瓶种子和发酵培养基（%）葡萄糖20 g；蛋白胨10 g；酵母膏2 g；水1 000 ml；pH自然。 1.4 药品二氧化氯（ClO2）为深圳市科瑞德消毒用品科技开发有限公司产品，商品制剂 ClO2含量为2%（YSS-325 TOMY KOGYO CO.LTD.日本，MFS-11多功能三维旋混仪（摇瓶机） 深圳潘西诺生物科技有限公司。 2 方法 2.1 ClO2对霉菌和细菌的抑制作用每个培养皿中加入20 ml斜面培养基，趁热加入 ClO2，摇匀，使 ClO2制剂最终浓度为0.1%～1.0%（每100 ml培养基中加 ClO2制剂0.1 ～1.0 ml），以未加 ClO2并经高压灭菌过的培养基作为对照。涂布法接种霉菌和细菌，每个浓度每种菌各接3个培养皿，霉菌置于28℃、细菌置于37℃恒温培养，隔天观察生长情况，培养5 d。 2.2 ClO2对赤芝的抑制作用 方法同上述，ClO2浓度为0.1%～5.0%，每个浓度设3个重复。接入赤芝菌丝，置于28℃恒温培养，隔天观察菌丝生长情况，培养10 d。 2.3 ClO2对其他种灵芝及食用菌的影响根据上述实验结果，确定培养赤芝时 ClO2的最适浓度为0.7%。在斜面培养基中，加入 ClO2，使其最终浓度为0.7%。接入其他灵芝菌和食用菌，每种菌种设3个重复，培养8～12 d。 2.4 ClO2对灵芝摇瓶培养的影响 将葡萄糖、蛋白胨培养基1 000ml装入3 000 ml三角瓶中，加入0.7% ClO2，立即用保鲜膜密封,摇匀,放置1 h，然后用灭过菌的棉塞替换保鲜膜，另设对照组，接入赤芝液体菌种，接种量10%。放入多功能三维旋混仪中培养，摇瓶温度30℃、转速为150 r/min。摇瓶3～4 d，发酵液有浓厚的灵芝特有的气味，并伴有大量的菌丝球时，可终止发酵。将发酵液在100目筛网中过滤，用自来水反复冲洗，然后将菌丝体置于80℃烘干至恒重，称重。以每升培养基中含菌丝干重表示（g L-1）。 3 结果 3.1 ClO2对霉菌、细菌的抑制作用由表1可知，对照管5 d之内都长满，而0.1%～1.0%的 ClO2对上述微生物有明显的抑制作用。其中真菌比原核微生物耐受 ClO2的能力强。 表1 ClO2对霉菌、细菌的抑制作用（略） +++表示菌丝或菌落长满平板；-表示无菌丝或菌落生长 3.2 不同浓度 ClO2对赤芝的抑制作用由表2得知，ClO2浓度在0.6%～0.7%时对赤芝有一定的抑制作用，使得赤芝萌发比对照晚2 d，但菌丝长满平板的时间均为10 d。ClO2浓度在0.8%～1.0%时，对灵芝的生长有明显的抑制作用，浓度2.0%时完全抑制赤芝菌丝的生长。 根据上述的结果，培养赤芝时，选用 ClO2的浓度为0.7%，此浓度对霉菌和细菌抑制作用强，但对