输血前免疫血清学检查—培训课件.pptVIP

离心 看结果 阳性 阴性 37 ℃ ? 37℃ 水浴30分钟 酶介质配血方法 抗球蛋白配血方法 患者 献血者 主侧 次侧 37 ℃ ? 37℃ 水浴30分钟 三洗 加抗球蛋白 离心 看结果 阳性 阴性 抗球蛋白配血方法 聚凝胺(Polybrene)配血法 患者 献血者 主侧 次侧 ? 室温放置 1 分钟 主次侧均 加聚凝胺 离心 聚凝胺引起红细胞非特异性凝集 阳性 阴性 主次侧均 加重悬液 看结果 聚凝胺(Polybrene)配血法 凝胶卡式检测法 是微柱凝胶技术与上述所有技术相结合的产物 1986年由法国人Dr.Yves Lappierre发明 1994年获得美国FDA认证，目前在许多发达国家已经作为常规技术应用于临床 戴安娜凝胶卡式检测法的工作原理 凝胶微柱：试管上端、柱体 过滤介质：颗粒直径26-103 nm的葡聚糖100凝胶，凝胶间缝隙只允许游离红细胞通过 缓 冲 液：LISS（加或不加抗血清） 将红细胞和抗血清加在凝胶上部反应，离心后观察 凝集的红细胞，被阻挡在小柱中凝胶的上部或中央，证明发生凝集反应，判断凝集反应阳性 游离的红细胞，被挤过装有过滤介质的小柱，而到达小柱的底部，证明未发生凝集，判断凝集反应阴性 结果判读模式 凝胶法鉴定ABO血型 凝胶抗人球试验————凝胶凝集试验与抗人球技术结合 凝胶酶试验———凝胶技术与酶技术结合 凝胶卡式检测法的方法评价 灵敏度高：凝胶卡式检测法灵敏度比低离子盐水法、凝聚胺法都高；与Coombs法相近，但是在实验的标准化、重复性方面具有更大优势，更适合常规的红细胞血型血清学检测 避免了试管法中必须清洗红细胞的烦琐步骤 方法容易掌握，易于标准化 塑料卡可以长期保存，也容易销毁 欧美国家常用抗球蛋白法或微柱凝胶法，因为白种人中约有9%是Kell（K）阳性，而凝聚胺对Kell系统不敏感。 我国中小医院适合用凝聚胺法，因为凝聚胺对Rh系统特别敏感，在我国以Rh系统引起的迟发性溶血性输血反应最为常见，而汉族人几乎100%为K抗原阴性，通常不考虑抗-K。 患者或供者ABO血型定型不正确； 患者血清中存在同种抗体，与供者红细胞上相应抗原起反应； 患者血清中存在自身抗体，与供者红细胞上相应抗原起反应； 患者血清中白蛋白与球蛋白比例不正常引起的缗钱状假凝集； 血浆扩容剂的影响或试剂被污染等。 主侧交叉配血不相合的原因 患者或供者ABO血型错误（重新定型，检查患者亚型、输血史及移植史） 主侧（+）、自身（-）、抗体筛选（-），可能原因： 患者血清中有抗体，但筛选细胞上无相应抗原（对患者进行抗体鉴定） 供者红细胞已被致敏（对供者做直抗试验） 患者血清中的同种抗体与供者红细胞上相应抗原起反应 （对患者进行抗体鉴定，选择无对应抗原的血液输注） 主侧（+）、自身（-）、抗体筛选（+），可能原因： 患者血清中可能同时存在自身抗体和同种抗体（对患者血清自身吸收及抗体鉴定，用吸收后血清配血） 白蛋白/球蛋白比值不正常（盐水添加试验解决缗钱状假凝集） 血浆扩容剂（如右旋糖酐）的影响（洗涤细胞，或等待扩容剂消失后重新抽取标本） 污染（使用洁净的器具和符合要求的试剂） 主侧（+）、自身（+）、抗体筛选（+），可能原因： 交叉配血实验中，离心力、离心时间不当，可造成假阴性或假阳性结果。 交叉配血注意问题 恒温水浴箱温度不正确也会造成错误结果。 出现溶血应判为阳性结果（标本本身溶血例外）。 受血者交叉配血试验的血标本必须是输血前3天之内的 含有冷凝集素的患者交叉配血时可采用37℃生理盐水洗涤3次，如还显弱凝集，再用42℃或45℃盐水洗1次再配血。 温抗体型的自身免疫性溶血性患者血清中的游离抗体有时很难吸收完全，导致配血困难。在排除同种抗体的情况下可选择凝集反应弱的同型血液输注，亦可输注O型洗涤红细胞。 某些紧急情况下需要快速配血，建议血清（血浆）与细胞比例为2:1，细胞悬液浓度为2%～3%。同时离心前孵育2～5min，有利于检测弱的ABO抗体。 婴儿输注O型血或ABO同型血时，应当采用母亲的血清（血浆）进行交叉配血。 原则上，一定要选择ABO和Rh（D）同型的血液。如果同型血不够用，可以输注O型相合的添加剂红细胞（红细胞悬液），这种红细胞所含血浆量很少。 AB型血液不能满足供应，可选择A型或B型红细胞，尽量不用O型血。 Rh（D）阴性血不够用，可以选择Rh（D）阳性血，但一定要确证患者体内没有相应抗体。另有生育能力的妇女不能用。 在大量输血时如果输的是同型相合的添加剂红细胞，供者之间可以不做交叉配血试验。 若是输了ABO不同型的相合红细胞，以后要尽快输注与患者同型的红细胞。 输血检查试验，是一项具有高度科学