宏基因组技术在海洋石油污染修复中的应用_0.docVIP

宏基因组技术在海洋石油污染修复中的应用 第 １ ２卷 第 ３期　 广 东 轻 ＿ 丁 职 业 技 术 学 院 学 报　 Ｊ ＯＵＲＮ ＡＬ 　 ＯＦ 　 ＧＵＡＮ ＧＤＯＮＧ 　 Ｉ Ｎ ＤＵＳ Ｔ ＲＹ 　 Ｔ Ｅ ＣＨＮＩ Ｃ ＡＬ 　 Ｃ ＯＬ Ｌ Ｅ ＧＥ 　 Ｖ０ １ ．１ ２ 　 Ｎｏ ． ３ 　 Ｓｅ ｐｔ ．２ ０１ ３ 　 ２ ０ １ ３年 ９月 　 宏基 因组技术在海洋 石油污染修复 中的应用 术 　 李　 静　 邓 毛 程　 　 王 文 文　 ， 　 （ １ ．广 东 轻 工职 业 技 术 学 院 食 品 与 生 物 工 程 系 ， 广东 广州 ５ １ ０ ３ ０ ０ 　 ２ ．广 东 高 校 特 色调 味 品 工 程 技 术 开 发 中 心 ， 广东 广州 ５ １ ０ ３ ０ ０ ） 　 摘　 要 ： 生物 修 复在 海 洋石 油 污 染 治理 中具有 重 要 地位 ， 虽然 目前环 境 中可 以培 养 的微　 生 物 比例 很低 ， 但微 生物 的 基 因资 源十 分 丰 富 ， 因 此 借 助 宏 基 因 组 技 术 可 以 克 服 传 统 生　 物修 复技 术 中微 生物 资源利 用 不充 分的 问题 ， 为利 用 未培 养微 生物 开展 环 境修 复提 供 了 　 有 效途径 。 本文　 要 介 绍 了宏 基 因 组技 术 实施 的 方 式 ， 并 结合 海 洋石 油 污 染的 特 点 ， 对　 该 技 术 的 应 用 现 状 作 了 阐述 。 　 关键词 ： 宏基 因组 ； 石 油 污染 ； 生物修 复　 中图 分类 号 ： Ｘ ５ ０ ５ 　 文献 标识 码 ： Ａ 　 文 章编号 ： １ ６ ７ ２ ． １ ９ ５ ０ （ ２ ０ １ ３ ） ０ ３ 　 ０ ０ ３ ５ － ０ ７ 　 方 法 如加入 消 油 剂 、 凝油剂等 ， 虽 然 这 些 方 法 可 以　 取 得一 定 的除油 效果 ， 但仍 普 遍存 在 除 油不 彻 底 和　 容 易造 成 二 次 污 染 等 问题 。采 用 生 物 法 进 行 石 油　 污 染修 复具 有 处 理 费 用 低 、 治理效果好 、 对 环 境 影　 １ ９ ９ １年 Ｐ ａ ｃ ｅ首 次 提 出 环 境 基 因 组 学 的 概 念 ， 　 并 构 建 了第 一 个克 隆 环 境样 品 中 Ｄ Ｎ Ａ的 噬 菌 体文　 库， 其 研究 目标 是在 环 境 胁 迫对 机 体 遗 传 变异 的过　 程 和机 理 中 ， 发掘环境应激和应答基 因的多态性。 　 １ ９ ９ ８年 ，鉴 于 土 壤 具 备 丰 富 的 微 生 物 资 源 ， 　 Ｈａ ｎ ｄ ｅ ｌ ｍ ａ ｎ … 通过 直 接 提 取 环 境 Ｄ Ｎ Ａ， 将 不 能 直 接　 用 传 统培 养方 法分 离 的 微 生物 的基 因 通 过转 化 、 克　 隆到 可培养 微 生物 中 ， 从 而 在 克 隆菌 株 上 获取 新 的　 生 物 活性 物 质 ， 首 次 提 出宏 基 因 组 （ ｍ ｅ ｔ ａ ｇ ｅ ｎ ｏ ｍｉ ｃ ｓ ） 　 技术的基本 流程。近年 来 ， 研 究 人 员 已 构 建 了 土　 壤、 海 底淤 泥 、 植物 树 茎 和红 树 林 等 宏 基 因组 文 库 ， 　 响小 、 无 二 次 污 染 等 优 点 ， 逐 渐 吸 引越 来 越 多 的研　 究 人员 和工 程技 术人 员深入 开展 研究 。 　 １ 　 宏 基 因 组 技 术 研 究 概 述　 Ｓ ｔ ｒ ｅ ｉ ｔ 等　 提 出了宏基 因组 技术 的一般 流程 ： 环　 境 中微生物 Ｄ Ｎ Ａ的分 离 、 Ｄ Ｎ Ａ文库 的构 建 、 目的基　 并 筛选 到 多种 生 物 活 性 物 质 。该 技 术 避 免 了传 统　 微 生 物学 基 于纯培 养 研 究 的 限制 ， 为更 加 充 分 地 开　 发 利 用未 培养 微生 物 、 并 从 完 整 的群 落 水 平 上认 识　 微生 物 的活 动提供 了可 能 。 　 因的 克隆及 筛选 、 目的基 因的扩 增和 应用 。 　 １ ． １ 　 样 品 总 ＤＮ Ａ 的 提 取　 样 品总 Ｄ Ｎ Ａ 的 提 取 方 法 有 直 接 提 取 法　 和 间 　 接提 取法　 两种 。直 接 提 取 法 是 将 样 品直 接 悬 浮　 于裂 解缓 冲液 中提 取 ， 此 方法 简 便 、 成 本较 低 ， 但由 　 于机 械损 伤较 大 ， 因 而 所 获 得 的 片 段 较 小 。 间 接 提　 当前 ， 随着海上溢油事 件频频 ， 海 洋 石 油 污染　 对 海 洋 生 态 的 影 响 受 到 越 来 越 广 泛 的关 注 和 重