中国防痨协会规程罗氏培养基.doc

结核病诊断实验室检验规程 4 第一章 结核病实验室检验基本规则 4 一、涂片实验室基本要求 4 二、培养和药敏实验室基本要求 4 第二章 涂片镜检和培养检查的临床标本采集 5 一、痰标本 5 ㈠采集标本的容器 5 ㈡标本采集 5 ㈢标本的性状 6 二、脓液、创伤感染及手术切除组织标本 7 三、穿刺液（脑脊液、胸水、腹水、心包液、关节液、胆汁、鞘膜液等） 7 四、尿液 7 第三章 抗酸杆菌（acid-fast bacilli，AFB）涂片镜检 7 7 一、痰标本镜检 7 二、其它类型临床标本的AFB镜检 12 三、废弃标本和污染物的处理 13 第二节 涂片镜检的质量保证 13 一、室内质量控制 13 二、室间质量评估 15 第四章 分枝杆菌分离培养 23 一、改良罗氏培养基培养法 23 二、丙酮酸钠培养基培养法 29 三、液体、琼脂培养基培养法 29 第五章 分枝杆菌药物敏感性测定 35 一、绝对浓度法间接法 36 ㈠培养基制作 36 ㈡菌悬液制备 37 ㈢ 接种和培养 37 ㈣ 结果报告 37 ㈤ 质量控制 38 二、比例法 38 ㈠ 培养基制作 38 ㈡ 菌液制备和稀释 38 ㈢ 接种和培养 38 ㈣ 结果报告及解释 39 ㈤ 质量控制 39 第六章 分枝杆菌菌种鉴定 39 一、分枝杆菌菌种鉴定的实验流程 39 二、分枝杆菌菌群鉴定试验 42 三、结核分枝杆菌复合群菌种鉴定试验 43 四、NTM菌群生长特征鉴定试验 45 五、NTM菌种鉴定常用生化特征试验 47 第七章 分枝杆菌菌株的保藏 55 第一节 保存菌株的应用价值 55 第二节 保存菌株的背景资料 56 第三节 菌种的保存方法 58 第四节 目前存在主要的问题和解决的对策 64 第八章 分枝杆菌的快速培养和药敏试验 65 第一节 标本的前处理与接种 65 一、各种标本的采集：参考培养检查法。 65 二、前处理： 65 三、方法学评价 66 第二节 质量控制 67 一、报告 67 二、药物浓度的配制 67 第三节 药物敏感性快速鉴定 68 一、BACTEC-TB460系统 68 二、BACTEC-960系统 69 三、BacT/ALERT 3D系统 74 四、MB-Bact分枝杆菌检测系统 75 五、Etest法分枝杆菌药敏试验 77 六、 微量快速显色药敏检测法 78 第九章 结核病免疫学检查技术 80 80 第二节 细胞因子检测 82 一、检测原理 82 二、检测标本 83 三、检测方法 83 四、结果的解释 83 五、注意事项 84 第三节 流式细胞术概述 84 一、流式细胞术工作原理 84 二、流式细胞术信号检测与分析 85 三、流式细胞术用于结核分枝杆菌药物敏感性试验的原理和步骤 85 第四节 生物芯片技术 86 一、基因芯片 86 二、蛋白芯片 87 第十章 噬菌体生物扩增法检测痰标本中的分枝杆菌 88 一、检测原理 88 二、操作步骤（以痰标本为例） 89 三、结果观察 89 四、检测意义 89 五、操作注意事项 90 第十一章 核酸基础的结核分枝杆菌检测技术 90 一、诊断 90 二、菌种鉴定 92 三、耐药性检测 93 四、基因分型 94 附录 96 分枝杆菌菌种分类与中文名称命名 96 结核病诊断实验室检验规程 第一章 结核病实验室检验基本规则 一、涂片实验室基本要求 1.实验室的分区与布局应符合生物安全防护的基本要求。 2.实验室出口处应设专用洗手池。 3.实验室的墙壁、天花板和地面应平整、易清洁、不渗水、耐化学品和消毒剂的腐蚀。地面应防滑。 4.实验台面应防水，耐腐蚀、耐热。 5.实验室中的储物柜和实验台应牢固。储物柜、实验台彼此之间应保持一定距离，以便于清洁。 6.实验室如有可开启的窗户，应设置纱窗。 7.实验室内应保证工作照明，避免不必要的反光和强光。 8.实验室应有适当的消毒设备。 9.实验室入口处应设挂衣装置，个人便装与实验室工作服分开放置。 二、培养和药敏实验室基本要求 1.满足涂片实验室的基本要求，并符合生物安全防护的要求。 2.实验室门应带锁可自动关闭，并有可视窗。 3.实验室应设实验操作间和准备间，具有足够的空间进行实验和放置物品。 4.进入实验室应使用专用工作服，操作时应戴口罩、帽子和乳胶手套 。 5.实验室的工作区域外应有存放个人衣物的条件。 6.实验室所在的建筑内应配备高压蒸汽灭菌器，并按期检查和验证，以保证符合要求。 7.实验室内应配备Ⅱ级生物安全柜。 8.实验室宜设应急洗眼和喷淋冲洗设施。 9.实验室如使用窗户自然通风，应有防虫纱窗。 10. 实验室必需有可靠的电力供应和应急照明。重要设备如生物安全柜、培养箱、冰箱等宜设备用电源。 11.实验室出入口应有在黑暗中可明确辨认的标识。