内含子比较.pptVIP

内含子类型 ;概念: ：1980年代初，发现原生动物四膜虫 (Tetruhymenu) 的rRNA内含子能够自我剪接(self splicing)，这一类内含子后被称作Ⅰ型内含子.后来在酵母菌的线粒体rRNA基因中也含有此类内含子. ;发现过程为: 1980年,科学工作者将四膜虫rRNA基因克隆到质粒中，并与E.coli 的RNA聚合酶一起保温，发现转录产物除了有约400nt的rRNA内含子外，还有一些小片段。从凝胶中回收rRNA前体，在无蛋白质的条件下保温培养，单一的rRNA前体依然可形成片段更小的电泳条带，其中移动最快的是39nt的条带，测序发现，它相当于413nt的rRNA内含子中的片段。将四膜虫26S rRNA基因的一部分(第l个外显子303bp + 完整的内含子413bp + 第2个外显子624bp)克隆到含噬菌体SP6启动子的载体内，再转录该重组质粒，将获得的产物与 GTP一起保温，可以得到剪接产物，但缺乏GTP时无剪接反应，证明rRNA前体的确可以进行有GTP参与的自我剪接。 ; (1) I型内含子剪接的过程 I型内含子剪接的第一次转酯反应，是由一个游离的鸟苷或鸟苷酸(GMP, GDP或GTP)启动的。鸟苷酸或鸟苷的3-OH亲核攻击内含子5-端剪接点的磷酸二酯键，将G转移到内含子的5-端，同时切割内含子与上游外显子之间的磷酸二酯键