柱前衍生高效液相色谱质谱法测定水稻中尼克烟酰胺含量论文.docVIP

　　柱前衍生高效液相色谱质谱法测定水稻中尼克烟酰胺含量论文 曹赵云 牟仁祥 陈铭学 【摘要】 建立了柱前衍生高效液相色谱质谱联用(HPLCMS)测定水稻中尼克烟酰胺含量的方法。样品中尼克烟酰胺经水提取后，与9芴甲基氯甲酸酯（FMOCCl）衍生,采用液相色谱质谱联用仪测定。系统研究了衍生剂浓度和衍生介质等条件对衍生效率的影响。通过优化流动相酸度和梯度洗脱等条件，提高了方法灵敏度。尼克烟酰胺在0.1～5.0 mg/L范围内呈良好的线性关系（r=0.9983），对水稻的根、茎、叶及大米的标准加入实验表明，方法的添加回收率在72.0%～89.2%之间； 相对标准偏差为2.3%～9.6%； 方法检出限为0.05 mg/kg。方法简便、准确可靠，可以满足水稻中生理水平尼克烟酰胺的定性定量分析。 【关键词】 尼克烟酰胺，水稻，柱前衍生.freelination of Nicotinamide in Rice by Precolumn Derivatization and High Performance Liquid ChromatographyMass Spectrometry CAO ZhaoYun， MOU RenXiang，CHEN MingXue (Rice Product Quality Inspection and Supervision Center, Ministry of Agriculture,China National Rice Research Institute, Hangzhou 310006) Abstract A method ination of nicotinamide(NA) in rice by precolumn derivatization and high performance liquid chromatography/electrospray ionization mass spectrometry(HPLC/ESIMS). After extraction ethoxycarbonyl(FMOCCl). In order to enhance the sensitivity, the derivatization ized regarding organic solvent content and amount of FMOCCl. The best HPLC conditions for the separation of NA in real samples n and mobile phase ic acid. The MS experiments ed in selected ion monitoring mode(SIM). The method shog/L for NA it of determination(LOD) g/kg. Precision and recovery studies , leaf and unpolished rice. The recovery(n=5) ranged from 72.0% to 89.2% 2.3% to 9.6%. The method is simple, highly selective and reliable, and can be used to determine NA in rice at physiological level. Keyide, rice, precolumn derivatization,.freelatographymass spectrometry 1 引 言 尼克烟酰胺（nicotianamine，NA），是植物体内的一种天然金属螯合剂1，在金属矿质元素由根系向地上部的长距离运输中发挥重要作用，同时也是调节植物对重金属元素吸收的关键物质2。已有研究表明，NA可参与Fe、Cu、Zn等多种金属元素的运输3，尤其是使植株对Cd、Ni等重金属的吸收有明显的抑制作用4,5。近年来，有关Cd在土壤食物中的迁移已成为Cd污染研究的热点6，而水稻是对Cd吸收较强的谷类作物7。因此，对水稻中NA进行快速、准确的测定，将为探明水稻中NA在提升稻米营养价值、降低重金属污染方面的作用提供重要的技术手段。 有关NA的测定方法，目前仅有少量报道，其主要是高效液相色谱法，测定样品也大多是NA含量较高的烟草等植物8～11。如OCCl）衍生化，生成可被反相柱保留的FMOCNA复合物，利用高效液相色谱单四极杆质谱联用技术（HPLCMS），解决了常规液相色谱测定NA时灵敏度低的问题，能满足水稻（根、茎、叶、籽粒）中生理水平尼克烟酰胺含量的测定。 2 实验部分