沉香随机扩增多态性DNA反应体系的建立论文.docVIP

　　沉香随机扩增多态性DNA反应体系的建立论文 邵敏 周鹤峰 唐历波 刘银花 李官成 【摘要】 目的对影响沉香随机扩增多态性DNA（RAPD）反应的各因素进行优化，建立适用于沉香RAPD的最佳反应体系。方法采用改良的CTAB法提取基因组DNA，变化单一因素的方法对模板 DNA浓度、Taq酶用量、dNTPs、引物浓度、Mg2+浓度、退火温度对RAPD影响进行分析。结果建立了适合沉香RAPD分析的最佳反应体系：在20μl反应体系中，模板DNA用量20 ng、Taq酶1.0 U、dNTPs浓度为0.3～0.4 mmol·L-1、随机引物浓度为0.6 μmol·L-1、Mg2+浓度1.5～2.0 mmol·L-1。PCR反应条件：94℃，10 min；94℃，1 min；36℃，1 min；72℃，2 min；45个循环.freelin。结论该反应体系具有良好的稳定性和重复性。 【关键词】 沉香； RAPD； 基因组DNA； 反应体系 Abstract：ObjectiveTo establish the optimum RAPD reaction system of Aquilaria agallocha Roxb.MethodsThe genomic DNA Aquilaria agallocha Roxb. by modified CTAB method,and the dif