豚鼠过敏试验与中性粒细胞吞噬功能实验小吞噬.pptVIP

中性粒细胞的吞噬作用 吞噬过程 1、无菌肉汤，白葡菌液，PBS缓冲液，瑞氏-姬姆萨染液。 2、注射器,解剖器材,玻片,显微镜等。 1.诱导：实验前1小时给小白鼠腹腔注射(头低位、曲形进针)无菌淀粉肉汤2ml，诱导浆液渗出。 2.注射：给小白鼠腹腔内注射白葡菌液1ml，轻揉腹部，让小鼠活动。 3.取样：注射后30分钟处死小白鼠，抽取腹腔液涂片。 4.干燥：室温或者放温箱中完全干燥标本。 5.瑞氏-姬姆萨染液染色： 滴加3滴A液于标本上，以完全盖住标本为宜，染色40秒。 滴加8滴B液，用洗耳球吹出微风使液面产生涟漪，使两液充分混匀，染色5分钟。 水洗（勿先倒掉染液，应以流水冲去）。 吸水纸拍干水分，干燥。 6.油镜镜检 小吞噬 涂片应薄厚均匀适中，避免过薄或过厚。 瑞氏染液染色时间不能过长以免染色过重。 附1：小白鼠的抓取和固定 通常用右手提起小鼠尾巴将其放在鼠笼盖或其它粗糙表面上，在小鼠向前挣扎爬行时，用左手拇指和食指捏住其双耳及颈部皮肤，翻转后将小鼠置于左手掌心、无名指和小指夹其背部皮肤和尾部，即可将小鼠完全固定。 2.腹腔注射 腹腔注射：左手提起并固定小鼠，使鼠腹部朝上，酒精棉球消毒进针部位，右手持注射器将针头在下腹部靠近腹白线的两侧进行穿刺，针头刺入皮肤后进 针3mm左右，接着使注射针头与皮肤呈45°角刺入腹肌，穿过腹肌进入腹膜腔，当针尖穿过腹肌进入腹膜腔