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下呼吸道细菌学检验的操作规范(讨论稿)
《下呼吸道细菌学检验操作规范(讨论稿)》;前 言;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;分析前下呼吸道标本检验;气管和内镜吸出物
(气管插管24h,就有定植菌,仅有临床症状时,否则切勿培养气管吸出物)
气管镜标本
(由肺科医生或受训后医生采集)支气管肺泡灌洗液(BAL)支气管灌洗液,保护性毛刷标本(PSB),支气管穿刺活检标本
支气管灌洗液-BAL-PSB-穿刺活检标本;标本运送;标本拒收规则;污染痰标本和气管内标本革兰染色拒收条件的评价(痰涂片 20-40/LP;气管吸出物低倍镜和油镜下都要检测);门诊接受到大量脓性标本,应立即接种,不必等待涂片结果。
拒收培养标本报告方式:
“涂片所见:每低倍镜视野含=10个扁平上皮细胞,提示标本质量差,不做培养;如果有临床指征请重新采集标本”
“涂片检查40个视野,未见细菌,不做培养;如果临床指征请与实验室联系”
不能拒收标本
送检军团菌培养、抗酸染色痰标本、气管吸出物和来自囊性纤维化患者的痰标本;分析中下呼吸道标本检验;标本接种
血平板、巧克力平板和麦康凯(或中国蓝/伊红美兰)
以下步骤可选择一项或多项:
在接种后的巧克力平板上贴杆菌肽纸片(10IU),用于抑制上呼吸道微生物菌群,提高流血嗜血杆菌检出率
用金葡ATCC25923点种接种后的血平板,便于直接观察嗜血杆菌的卫星现象
血平板的第二个1/4区贴奥普托辛(OP)纸片,可在原始平板上直接检测抑制肺炎链球菌的生长。不推荐常规使用,如有大量社区感染肺炎患者标本时可考虑使用;培养
35-37℃、5%CO2条件培养48h,最好至72h;
侵入性方法采集的肺标本,培养延长至4天
;直接试验
革兰染色
注明细胞、细菌量以及评价结果 见表3
胆汁溶菌试验
革兰阳性双球菌;表3 痰涂片革兰染色结果解释;指征;培养结果检查
观察24h后平板
继续培养平板24-48h,为检出霉菌、慢生长菌、苛养的革兰阴性杆菌如博德特菌属
革兰染色结果解释培养结果
炎性细胞和细菌来决定对培养物下一步处理
如培养与涂片不符,重新读片
按照表4报告
鉴定以下有临床意义的可疑致病菌,排除正常菌群;常见呼吸道重要致病菌
链球菌
苛养革兰阴性菌
革兰阴性双球菌
革兰阴性杆菌
葡萄球菌
革兰阳性杆菌;链球菌
Beta-溶血、触酶阴性呈链状或成对排列的球菌
化脓链球菌(PYR+)任何数量都要报告
患儿标本检查有小溶血环并鉴定B群-溶血链球菌,任何数量都要报告
优势菌时,有意义数量的Beta-溶血链球菌
不要报告小菌落的beta-溶血链球菌或F群链球菌,因为这些菌是上呼吸道正常菌群;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;链球菌
Alpha-溶血链球菌
Optochin敏感实验
胆汁溶菌实验
(联合上述两个实验进行鉴定)
药敏实验,贴OP纸片确认纯度以检查药敏结果是否有污染;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;苛养革兰阴性杆菌
流感嗜血杆菌,卫星现象,ALA实验确认鉴定并作beta-内酰胺酶试验。
百日咳博德特菌 触酶和尿素酶阳性,培养48h出现肉眼可见菌落
巴斯德菌 吲哚和氧化酶阳性,动物口腔正常菌群
侵蚀艾肯菌 上呼吸道正常菌群,无需鉴定;Evaluation only.
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Copyright 2004-2011 Aspose Pty Ltd.;革兰阴性双球菌
卡他莫拉菌
G-双球菌,氧化酶阳性,血平板上可推动,丁酸盐试验阳性
淋病奈瑟菌和脑膜炎奈瑟菌?
需检验并报告,不需做药敏试验
当培养达到有意义数量时,即使不是优势菌,也报告(表4);Evaluation only.
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