发酵工业原料及其处理.pptx

第三章 发酵工业原料及其处理;培养基;发酵工业原料的种类和成分 淀粉水解糖的制备 培养基的设计和优化 发酵培养基灭菌;第一节　发酵工业原料的种类和成分;一、培养基的类型和用途;1. 按来源分;2. 按培养基外观的物理状态分;3、按功能分;（1）孢子培养基;（2）种子培养基;二、发酵培养基中各种成分的定量;1. 碳源;2. 氮源;3. 无机盐;4. 生长因子;5. 前体;6. 促进剂;7. 抑制剂;三、工业上常用作碳源的淀粉质原料;1. 淀粉;2. 淀粉质原料;李江华，无锡轻工大学学报，2004;嗜碱芽孢杆菌(AC-2)中碳源对碱性纤维素酶分泌的影响;四、工业上常用作氮源的蛋白质类原料;1. 有机氮源;玉米浆;2. 无机氮源;无机氮源被菌体作为氮源利用后，培养液中就留下了酸性或碱性物质。 (NH4)2SO4 → 2NH3 + 2H2SO4 NaNO3 + 4H2 → NH3 + 2H2O + NaOH 生理酸性物质：经微生物生理作用（代谢）后能形成酸性物质的无机氮源叫生理酸性物质，如硫酸铵。 生理碱性物质：若菌体代谢后能产生碱性物质的则此种无机氮源称为生理碱性物质，如硝酸钠。;氨水;例：无机氮源对毛霉产蛋白酶的影响;五、发酵培养基中的无机盐和生长因子;黑曲霉NRRL-330生产α-淀粉酶， P对酶活的影响;2. 硫酸镁;3. 钾盐;4、生长因子（生长素）;六、前体物质和促进剂、抑制剂; ;使用方法;2. 促进剂;3. 抑制剂;?;第二节 淀粉水解糖的制备;一、淀粉水解糖的制备方法;淀粉糖化的方法;不同糖化工艺所得糖液质量比较;不同糖化工艺比较;淀粉糖化工艺的比较;二、水解糖液的质量要求;第三节 培养基的设计和优化;培养基组分的选择 培养基组分配比的确定 不同规模培养基的优化 培养基设计时的注意事项;一、培养基组分的选择;做好调查研究工作。;二、培养基组分配比的确定;1、进行细胞生长和产物形成的化学平衡计算;2、实验确定;（1）单因子试验;（2）多因子试验;① 正交设计;操作步骤;操作步骤;实验号;操作步骤;② 均匀设计;当试验中有m个因素，每个因素有n个水平时： 全面试验：共有nm种组合； 正交设计：挑选出n2个试验； 均匀设计：选取n个点试验。;操作步骤;③ 响应面设计;操作步骤;类胡萝卜素高产菌Y11的培养基的优化;类胡萝卜素高产菌Y11的培养基的优化;初始培养基;1、初步确定可能的培养基组分;2、单因子试验确定最适的碳源;乙酸钠的浓度0.2%比较好;确定最适的培养基组分;3、正交实验确定最适培养基组分配比;;优化后培养基配方：;;三、不同规模培养基的优化;pH控制摇床：反应器水平上的摇瓶研究;青霉素发酵;四、培养基设计时的注意事项 ;葡萄糖与铵盐或氨基酸的氨基在灭菌高温下作用形成深褐色物质，不能被微生物利用，因此二者需分开灭菌。 硫酸铵中的SO42-与钙盐易形成难溶的硫酸钙，因此二者也不宜直接配成培养基。;铁、锰和锌离子都能明显影响柠檬酸产量； 钙离子对细菌淀粉酶的生产有促进作用； 钴离子对葡萄糖异构酶的发酵是必需的。;第四节 发酵培养基灭菌;一、常用灭菌方法;二、培养基和设备的灭菌;（一）培养基湿热灭菌原理;1、微生物的热阻;某些微生物的相对热阻及其对一些灭菌剂的相对抵抗力;2、微生物的热死定律——对数残留定律;以微生物残留活菌数（Nt/N0）的对数与灭菌时间（t）作图，即得残留曲线，其斜率为-k（反应速率常数）。;3、反应速率常数;121℃某些细菌芽孢的k值;（二）灭菌温度与时间的选择;培养基灭菌过程中;温度升高： 死亡速率的增加＞培养基成分破坏速率的增加;（三）影响培养基灭菌效果的因素;培养基的pH 培养基pH值愈低，灭菌所需时间愈短。 pH 6.0～8.0时，微生物最耐热。 pH＜6.0，微生物容易死亡。 培养基中的微生物数量 培养基中微生物数量越多，灭菌所需时间越长。 微生物细胞中水含量 微生物细胞含水越多，越容易死亡。 微生物细胞的菌龄 年轻细胞比年老细胞容易死亡。 微生物的耐热性 细菌营养体、酵母细胞、霉菌的菌丝体对热较敏感；放线菌、酵母、霉菌孢子抗热性稍好；细菌芽孢抗热性更强。;空气排除情况 如果罐内空气排除不完全，罐内的实际温度就低于压力表显示压力所对应的温度。 搅拌 必须保证培养基在罐内始终均匀地充分翻动，从而防止培养物质过多破坏或局部温度过低而杀菌不透。 泡沫 泡沫影响热量传递，不易达到微生物的致死温度。 培养基体积 体积越大，灭菌所需时间越长。 ;三、发酵培养基灭菌工艺;1、空罐灭菌;（一）间歇灭菌;间歇灭菌的过程;（1）升温;（2）保温;（3）冷却;（二）连续灭菌;连续灭菌的基本设备;连续灭菌的基本工艺流程;（1）预热;（2）加热;（3）保温;（4）冷却