实验四酵母菌霉菌放线菌个体形态观察.ppt

一 实验目的 学习并掌握观察酵母菌、霉菌和放线菌形态的基本方法，了解常见菌种的的基本形态特征； 学会插片法对微生物的个体形态进行观察。 二 实验原理 微生物菌落即微生物聚集在一起的群体结构。在自然界中，我们肉眼所见到的微生物都是以菌落状态存在，不同种类的微生物有其特定的群体结构。因此，根据群体结构（菌落特征），我们可以初步把它们“分门别类”作粗略鉴定。本实验通过对细菌、放线菌、酵母菌，霉菌等四大类微生物菌落特征的观察，学习以菌落特征来区分四大类微生物的基本方法。 三 实验材料 第二周从土壤中通过稀释平板分离得到的微生物； 标准菌株（酵母菌、霉菌、放线菌）； 载玻片、盖玻片、接种环、酒精灯及火柴、尖头镊子、石炭酸复红染色液、显微镜等。 四 实验步骤 （一）菌落特征的观察 用肉眼观察生长在琼脂平板上的各种霉菌菌落，并根据下列要求对每种霉菌的菌落特征加以描述。1.菌落的大小：局限生长或蔓延生长，菌落的直径和高度。2.菌落的颜色：正面和背面的颜色，培养基的颜色变化。3.菌落的形态：棉絮状、网状、疏松或紧密、同心轮纹、放线状的皱褶等。 四大类微生物菌落比较表 （二）个体形态特征的观察——插片法 （二）个体形态特征的观察——插片法 （以放线菌为例） ① 接种：挑取菌种在培养基平板上密集划线接种或取0.2ml菌液涂布平板； ② 插片：无菌操作用镊子取灭菌盖玻片以约45°角插入平板琼脂接种线上； ③ 培养：将平板倒置，于28℃培养3-5天； ④ 镜检：用镊子小心取出盖玻片，用纸擦去背面培养物，有菌面朝上放在载玻片上，通过显微镜直接用低倍镜和高倍镜镜检观察（在盖玻片菌体附着部位低价0.1%吕氏碱性美蓝染色后观察效果更好）。 五 注意事项 在插片法操作过程中，注意在移动有附着有菌体的盖玻片时勿碰动菌丝体，必须菌面朝上，以免破坏菌丝体形态； 用接种环将菌体与染液混合时不要剧烈涂抹，以免破坏细胞； 滴加染液要适中，否则用盖玻片覆盖时，染液过多会溢出，过少会产生大量气泡； 盖玻片要缓慢倾斜覆盖，以免产生气泡。 在直接制片观察中，用镊子取菌和用解剖针分散菌丝时要细心，尽量减少菌丝断裂及形态被破坏。 六 思考题 1、描述自己分离到的微生物的菌落特征及个体形态特征？ 2、总结利用插片法进行个体形态观察的操作要点？ 福建农林大学生命科学学院 福建农林大学生命科学学院 真菌的菌落 细菌的菌落 真菌的菌落特征可作为分类依据之一： 往往有霉味 常有酒香味 有泥腥味 往往有臭味 气味 多为无限 有限 有限 有限 生长范围 较牢 不牢 牢固，不易挑取 不牢 与基质结合程度 快 较快 慢 一般较快 生长速度 绒毛状，粉状，棉絮状，蜘蛛网状，菌丝疏松 表面湿润粘稠 初期似细菌菌落，晚期为粉状干燥 光滑或粗糙，湿润或干燥，较粘 表面状态 多样（白，灰蓝、绿黑、粉红等）正反面一般颜色不同 多为乳白色 多样（灰白、白红、粉红、蓝、紫、橙等）正反面颜色不同 多样（乳白、灰白、灰、红、荧光等）正反面颜色相同 颜色 大 比细菌大而厚 较小 一般较小 大小 多为原形 圆形 辐射状 小点状，多为圆形，个别呈根状，辐射状 菌落形状 马铃薯 马铃薯 高氏一号 牛肉膏 霉菌 酵母菌 放线菌 细菌 培养基 　接种和分离工具 1．接种针 2.接种环 3.接种钩 4.5.玻璃涂棒 6.接种圈 7.接种锄 8.小解剖刀 福建农林大学生命科学学院