生物学实验3-细胞要领.pptVIP

基础生物学实验三 光学显微镜的结构和使用 动物细胞的基本形态与显微测量 细胞器的显示与观察 细胞膜的通透性 植物细胞骨架的光学显微镜观察 液泡系和线粒体的活体染色 实验一普通光学显微镜的结构和使用 * 【实验目的】 了解普通光学显微镜的构造及原理，熟练掌握其操作方法； 了解人血与蛙血细胞的形态差异。 【实验原理】 显微镜种类： 显微镜的组成系统：光学、机械、电子。 普通光镜的光学系统：物镜、目镜、聚光器、光阑等。 普通光镜的机械系统：镜筒、镜臂、物镜转换器、调焦螺旋（粗调和细调）、载物台、镜座等 【实验步骤】 A：显微镜的使用 取用显微镜时，右手握镜臂，左手托镜座，避免倾斜； 接通电源，打开光圈，上升聚光器； 标本片置于载物台上，材料对准通光孔； 低倍下调焦； 选择合适区域推到中央，换高倍镜调焦（细调）； 观察绘图； 结束时将显微镜复原到非工作状态。 显微镜使用的注意点： 禁止单手提拿显微镜和随意拆卸零部件； 低倍下调焦时先上升载物台（或下降镜筒），再缓慢下降载物台或上升镜筒，使物镜镜头与玻片距离由小到大调焦。一般直接转换成高倍镜后细调焦距； 观察标本时两眼同时睁开； 调节合适的光圈和电流强度可使成像更清晰； 如果使用100×油镜，应在标本上滴一滴香柏油，使镜头底端与该介质接触。观察完后及时用二甲苯擦拭油镜头。注意其它镜头不得接触香柏油。 【实验步骤】 B：操作练习：血细胞涂片的观察 材料：人血和蛙血涂片 观察内容：血细胞的组成；两种红细胞的形态差异等。 附：字母装片，精液涂片。 【作业】 绘图：人血和蛙血细胞形态 实验二 动物细胞的基本形态与显微测量 【实验目的】 掌握光镜下多种细胞的形态和结构特征； 掌握显微测微尺的使用和测量细胞大小的方法。 【实验原理】 动物各种不同组织的细胞具有不同的形态大小等特征 上皮组织： 单层扁平上皮 单层立方上皮 单层柱状上皮 复层扁平上皮 …… 结缔组织： 骨 软骨 血液 …… 肌组织： 骨骼肌 心肌 平滑肌 神经组织 单层柱状上皮与复层扁平上皮 骨骼肌细胞与心肌细胞 平滑肌细胞 神经元 肝细胞 【实验原理】 显微测微尺由目镜测微尺和镜台测微尺组成，台尺的每小格已知0.01nm，在相应放大倍数的物镜下对目尺加以标定后，即可通过目尺准确测量细胞的大小。 【实验步骤】 A. 分别观察肠上皮细胞、骨骼肌细胞、心肌细胞、神经细胞和肝细胞等切片，注意比较鉴别细胞的形态结构，核形态数量和位置等特征。 B. 蛙血细胞大小的测量 1.蛙血涂片的制备 2.目镜测微尺的标定 3.细胞大小的测量 【作业】 1. 绘图：各种细胞的形态结构 2. 记录5个以上的蛙血细胞的长、短径，得到平均细胞大小 实验三 细胞器的显示与观察 【实验目的】 了解光镜下细胞器的形态和分布 掌握超活染色法制作光镜标本的基本方法 【实验原理】 活体染色是能使活的细胞或组织着色且无毒害的一种染色方法。可用于研究生活状态下的细胞形态结构和生理或病理变化。 活体染料被特异性地固定和堆积在细胞内某种细胞器上而显色。活体染色分为体内活染和体外活染（超活染色）。 詹纳斯绿B是毒性较小的碱性染料，可专一性地对线粒体进行超活染色。其原理是由于线粒体内细胞色素氧化酶系的作用，使JGB保持氧化状态，呈亮绿色；而周围的细胞质中染料被还原为无色的色基。 【实验步骤】 人口腔上皮细胞线粒体的超活染色与观察 用牙签刮取口腔颊部粘膜的上皮细胞，在洁净的载玻片上与1d JGB染液混匀，染色15min以上。盖上盖玻片，光镜下观察线粒体的形态和分布。 B. 小鼠肝脏细胞线粒体的超活染色与观察 取小鼠肝脏边缘较簿组织，置于含Ringer液平皿中挤压洗涤2-3次，吸去Ringer液，加JGB染液染色30min， Ringer液洗涤1次后转移至载玻片，将组织拉碎，去稍大的组织块，盖上盖玻片，镜检。 C. 高尔基复合体标本的观察 兔脊神经节切片 D. 动物细胞中心体标本观察 【作业】 绘图：人口腔上皮细胞（显示线粒体） 小鼠肝细胞（显示线粒体） 兔脊神经节细胞（显示高尔基体） 实验四 细胞膜的通透性 【实验目的】 掌握细胞膜的选择通透性和细胞内外水分子交换的原理。 【实验原理】 细胞与周围环境之间可进行选择性物质交换。水分子通常以简单扩散的方式通过细胞膜，如果细胞内外存在渗透压差时，水分子表现从渗透压低的一侧向高的一侧扩散。将红细胞置于低渗溶液中，溶剂很快进入细胞内，发生溶血，释放出血红蛋白，重新封闭的红细胞膜构成血影。而在高渗溶液中，动物细胞发生脱水皱缩。 将红细胞置于数种等渗溶液中，由于红细胞膜对各种溶质的通透性不同，有的不能通过，能通过的溶质通过的速度也有差