第14章核酸合成转录.pptVIP

DNA的大小与基因 结构基因(structure gene)： DNA分子中能转录出RNA的区段 1、重复 2、重叠 3、不连续 2、 DNA的不对称转录  .DNA双链上，仅一股链转录，另一股不转录。 模板链：反意义链（antisense strand，(-)链）—— 以该链中的DNA碱基顺序指导RNA的合成即被转录的那条DNA链。 5’-----GCAGTACATGTC-----3’编码链 DNA 3’-----CGTCATGTACAG-----5’模板链 5’-----GCAGUACAUGUC-----3’ mRNA N ------Ala--Val--His--Val------C 蛋白质  3、RNA聚合酶——依赖DNA的RNA聚合酶（DNA-dependent RNA polymerase,DDRP） 以DNA为模板，催化2个游离的NTP 形成3’，5’-磷酸二酯键 14.2 原核生物的转录 14.2.1 大肠杆菌RNA聚合酶的组成 （1）全酶(holoenzyme) 由4种(5个)亚基α2ββ’σ组成 （2）核心酶(core enzyme) α2ββ’ ，参与转录的全过程 （3）σ亚基（起始亚基） 亦称σ因子（σ factor)—转录辅助因子 识别启动子 ω亚基功能未知 大肠杆菌RNA聚合酶的结构示意图 亚基 α2 β β’ σ 全 酶 核 心 酶 14.2.2 原核生物的启动子（promoter）1、启动子 RNA聚合酶全酶识别、结合、开始转录的DNA序列（双链） 转录因子RNA聚合酶起始转录所需要的辅助因子（蛋白质） 结合过程： 闭和的启动子复合体 RNA聚合酶（全酶）中的σ因子在DNA双链 上迅速、随机滑动，寻找到启动子-35区， 形成疏松的复合物，DNA双链未解开。 开放的启动子复合体 RNA聚合酶（全酶）移向-10区和转录起始 14.2.3.3 延长---- 转录泡RNA聚合酶（核心酶）　◆与DNA模板紧密结合，沿3’ 5’方向移动　◆解旋作用：DNA解开　◆聚合功能（不具外切酶功能） 杂交螺旋 ◆ RNA-DNA形成杂交螺旋 ◆ 转录产物RNA沿5’ 3’方向延长 14.2.3.4 转录终止：终止子和终止因子   转录至模板某一位置 停止形成磷酸二酯键  RNA—DNA杂交链解开 DNA解链的部分重新形成双螺旋 RNA聚合酶离开DNA 终止子（terminator） ——提供转录终止信号的DNA序列 终止因子（termination factor） ——协助RNA Pol识别终止信号的辅助因子 第一类：依赖ρ-因子的终止 DNA模板上有终止信号  转录出来的RNA Pol遇此结构停止工作 DNA和RNA（dA ：rU） 稳定性下降 富含GC/AT的回文结构 自身互补形成 发夹状结构（hairpin） 3’尾端有≥4个U DNA恢复双链， 释放转录产物 14.2.4.1 原核生物mRNA 多顺反子 转录与翻译同步 mRNA不需加工 寿命短 14.2.4 .1tRNA的加工 碱基修饰 3’端 5’端 切除反密码环 的内含子 稀有碱基--- Tψ 脱氨 --- AMP IMP 还原 --- DHU 甲基化--- mA mG CCA-OH RNaseP切除多余的核苷酸 RNaseP 在前tRNA二级结构基础上 14.3.1 真核细胞RNA聚合酶 在DEAE-Sephadex柱上的洗脱次序称为酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ 4、真核与原核生物mRNA的区别 原核生物mRNA 多顺反子 转录与翻译同步 mRNA不需加工 寿命短 真核生物mRNA 单顺反子 转录后需加工运至 胞浆再翻译 mRNA需加工 寿命较长 真核生物的mRNA转录后加工 转录产物：hnRNA（核不均一RNA） + 蛋白质 不均一核糖核蛋白（hnRNP） 加帽 加尾 mRNA前体的剪接 5’端：m7GpppGpN 作用:稳定mRNA 5’端 和翻译的起始有关 3’端: polyA尾巴 作用：稳定mRNA 和翻译模板活性有关 剪除内含子，连接外显子 ● 14. 4 核酶---真核生物rRN