第4章细胞拆合与重组2.pptVIP

* * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * （3）是否是完全的复制 影响克隆动物遗传性状的因素： 细胞突变 受体卵细胞的细胞膜与细胞质的差异 受体遗传上或生理上的差异 后期生长的环境与驯化 4.6 动物细胞核移植 克隆动物可应用性的思考 4.6 动物细胞核移植 社会学和伦理学问题 4.6 动物细胞核移植 4.6.6 克隆动物的现状和发展趋势 动物克隆技术现状与不足 希尔，克隆羊端粒比同龄羊短 雷纳，体细胞核移植可能影响克隆动物免疫系统的发育 4.6 动物细胞核移植 动物克隆存活率低、发育异常原因 缺乏理论支撑：基因组重新编程机制尚不清楚 动物克隆种属及细胞差异 动物克隆技术条件的优化还未解决 4.6 动物细胞核移植 * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * * 胚胎细胞核移植 未着床早期胚胎 单个细胞 去核未受精卵母细胞 融合 发育成胚胎 移入受体 4.6 动物细胞核移植 胚胎干细胞核移植 胚胎干细胞系——具细胞全能性 结合细胞核移植技术 4.6 动物细胞核移植 胎儿成纤维细胞核移植 1996年，英，用此法克隆出3只山羊 4.6 动物细胞核移植 体细胞核移植 1997年2月，英，爱丁堡罗斯林研究所， 伊恩·维尔穆特 多利 4.6 动物细胞核移植 多利羊（Dolly)风暴 1997．2．27 Nature 385：810－813  多利羊1996. 7 出生1996. 11 收到文章1997. 2 文章发表 4.6 动物细胞核移植 多利羊成为明星 4.6 动物细胞核移植 多莉与它的假母 4.6 动物细胞核移植 4.6 动物细胞核移植 4.6 动物细胞核移植 4.6 动物细胞核移植 4.6 动物细胞核移植 4.6 动物细胞核移植 4.6 动物细胞核移植 4.6 动物细胞核移植 克隆“多利”成功 解决了用体细胞做核供体与转基因的问题 4.6 动物细胞核移植 解决了使核供体细胞与核受体细胞（去核卵细胞） 同步的方法。 研究发现： 在供体核植入受体胞质后，不管是供体还是受体，处在分裂中期时更容易恢复全能性，原因可能有两个 4.6 动物细胞核移植 1、如果供体核处于分裂中期，则供体核由于核膜的缺失， 使得受体的调控因子更容易与供体核发生接触而发生作 用。 4.6 动物细胞核移植 2、如果受体处于分裂中期，则受体存在许多因子可以使得 供体核的核膜消失，从而调控更容易其作用，全能性更 容易恢复 4.6 动物细胞核移植 “多利”的生物学意义 证明一个已经完全分化的动物体细胞仍然保持着胚胎 细胞的全部遗传信息 可以按照人的意志去改造、生产物种。 利用克隆技术复制哺乳动物的技术障碍已被突破， 在理论上已成为可能。 4.6 动物细胞核移植 1998年7月，美国，夏威夷 大学 Ryuzo Yanagimachi 复制了五十几双不同世代的 老鼠 The Honolulu Technique 4.6 动物细胞核移植 胚胎成功发育的关键 染色体套数是否能维持正常 胚胎发育过程中正确的基因表現调节 卵细胞和细胞核供应者两方的细胞周期阶段 两方之间的活动是否能互相配合 4.6 动物细胞核移植 4.6 动物细胞核移植 4.6 动物细胞核移植 1997年5月，Wilmut等 人类血液凝结因子成功的选殖到两只复制羊， Molly及Polly。 4.6 动物细胞核移植 多利和它的三个孩子 4.6 动物细胞核移植 尚未弄清的疑惑 已分化细胞的 DNA，如何能够被逆转回最初的受精卵时期的状态？它的机制是什么？ 细胞周期的相配与核移植实验成功之间，真正的连接机制又是如何？ 复制羊（cloned sheep）的成功并不代表所有的哺乳类都可能援用同样方式 4.6 动物细胞核移植 4.6.4 克隆技术的应用与意义 检验动物细胞全能性 加速动物繁殖、优良育种、保护珍贵动物 医药领域（模拟疾病、基因治疗、器官移植等） 4.6 动物细胞核移植 （1）技术尚不成熟 成功率低 夭折率高 4.6.5 正确看待克隆技术 4.6 动物细胞核移植 几个影响因素 1、营养过多发育过快，克隆动物一般都有发育过快的问题， 体外培