提取和RAPD标记的初步研究.PDFVIP

杭州师范学院学报(自然科学版) Vo l. 4 No. 2 第 4 卷第 2 期 2005 年 3 月 Journal 01 Hangzhou Teachers CollegeCNatutalScience Edition) Mar. 2005 rc 章编号: 1008-9403(2005)02一0121 一03 不同性别类型黄瓜品种基因组DNA 的 提取及 RAPD 标记的初步研究 向太和，王利琳，胡江琴，庞基良，余爱华 (杭州师范学院生命科学学院，浙江杭州 310012) 摘 要:采用改良的异丙醇沉淀法成功地提取了 11 个不同性别类型黄瓜品种的基因组 DNA. 以此作为 PCR 扩增反应模板进行 RAPD 分析，结果从 22 个 10bp 随机寡核昔酸引物中筛选出 2 个引物 S23 和 S91 在全 雌性品种 MT700 和其他性别类型的品种之间稳定地扩增出多态性.至于该多态性标记是否与黄瓜雌性性别有 关，还有待进一步分析. 关键词:黄瓜;性别类型:基因组 DNA;RAPD 标记 中图分类号:S943.2 文献标识码:A 黄瓜(Cucumis sativus L. )是重要的蔬菜作物，其性别表现复杂多样，主要有雌雄同株异花(Monoe ~ious )、全雌株 (Gynoecious) 、全雄株 (Androdiecious) 、两性株 (Hermaphroditic) 、雄花两性花同株(An­ :l romonoecious) 、雄花雌花及两性花同株(Trimonoecious) 等不同的性别表现类型[l~ 川其中雌雄同株异花 是目前主要栽培类型.在生产上黄瓜雌花节位的多少和高低是影响产量的主要因素，黄瓜的雌性系往往表 现出丰产、早熟、瓜密、采瓜期集中等优点[41; 此外，据统计目前我国生产上 80% 以上种植的黄瓜品种为杂 种一代，而利用雌性系制备杂种一代无需人工除雄和授粉，节约劳力、降低制种成本、杂种纯度高，并且雌 性系作母本制备的杂种一代也多表现为早熟、雌花多等优良习性[5J 但在生产实践中，由于黄瓜的遗传背 景复杂多样，雌性系的选育难度大、成功率低，并且在具体选育过程中需要到植株生长的后期一一开花期 方能从花的形态上对雌性系进行判断和鉴定[6J 根据文献报道，黄瓜植株的性别表现受多个遗传基因位点的影响，如 F、 gy 、 In-F 等性别决定基因或位 点[7-叫而目前有关植物性别决定基因的研究主要集中在大麻、番木瓜、波菜等雌雄异株的植物，有关黄瓜 性别决定基因的分子标记方面的研究相对较少[9J 为此，该研究选择生产上广为种植的普通性别的黄瓜品 种和全雌性、强雌性品种作为实验材料，首先研究了黄瓜基因组 DNA 的简便提取方法，并用 10bp 的随机 寡核甘酸引物进行 RAPD 分析，以期获得与黄瓜性别决定基因相关的分子标记，进而为克隆黄瓜性别决 定基因、探索黄瓜性别决定的分子机理提供必要的前提和基础.现将初步的研究结果报道如下. 收稿日期:2005-01-21 基金项目 z 浙江省自然科学基金项目(编号:Y304083). 作者简介:向太和0965 一九男，安徽青阳人，杭州师范学院生命科学学院副研究员、副教授，遗传学博士，主要从事植物细胞和基因工 程及生物信息学的研究. 122 杭州师范学院学报(自然科学版) 2005 年 1 材料和方法 1. 1 材料 实验所用的黄瓜品种及性别类型见表1. 1. 2 DNA 的提取 表 1 实验所用的黄瓜晶种及性别类型 参考卢扬江和郑康乐[10] 提取水稻 DNA 编号 品种名称 性别类型 来源 1 天津黄瓜研究所