阿贝显微镜成像原理.ppt

三、空间滤波 空间频率与波的衍射角相关，可以据此做成低通、高通或带通的滤波装置。 低通 高通 带通 物为一维矩形光栅，滤波器为一可调单狭缝 光栅结构 频谱及截取 像波函数 像光强函数 像 物为二维正交网格，滤波器为一可转动单缝 （Abbe-Porter 实验） 一个实例：指纹打卡器 另一个实例：相衬显微镜 人眼对振幅的差别可以看出来，但对相位的差别是不能察觉的。 对于完全透明的标本，因为其各个部分对于光波的吸收基本一致，普通显微镜无法看到。但这并不是说光波在经过透明标本的不同部分时不受影响或受到的影响都一样。事实上，由于不同部分的折射率不同，虽然光通过后成像的振幅基本一致，但光波在通过时的光程是不一样的。 泽尼克提出相衬法，根据相衬原理制备了相衬显微镜（ phase contrast microscope）又叫相差显微镜。它把样品的相位信息通过一种特殊的滤波器，转化为输出像面上的光强分布，使相位型样品的折射率信息变为可见的强度分布。泽尼克发明的相衬法和相衬显微镜是光学空间滤波和信息处理技术应用实际方面的一项首创性工作。 相衬显微镜的主要特点是不需要对标本进行染色，这就避免了在染色过程中由于化学作用可能引起的标本内部结构的变化。有些染不上色的标本也可以用相衬显微镜来观察。各种显微镜都可以通过加附加装置来达到看相差的目的。 定时相衬显微镜的肺炎野生型菌株R6 优质水藻展现令其内部显现红色的天然色素——虾青素。水藻每一个都是直径约为40微米的单细胞。由这种藻类细胞生成的虾青素被用于制作橙红色的颜色。美国华盛顿州伊萨夸市专业摄影师查尔斯·克莱布斯(Charles Krebs)利用相衬显微镜技术，捕捉到取自室外池塘的水藻样本的照片。 泽尼克(Frizs Zernike, 1888-1966) 1953年获诺贝尔物理奖 既然电子显微镜的成像原理与光学显微镜极其相似，我们先偏离一下主题，用一种新的方式考察一下光学成像的原理，以便更好地理解电子显微镜的各种实验技术。 阿贝显微镜成像原理 Ernst Karl Abbe (1840 - 1905)，德国物理学家。1840年 1月23日生于爱森纳赫。他的父亲是纺纱工人，家境贫困,阿贝靠别人资助才得以上中学和大学，于1861年在耶拿大学获得博士学位。1863年在耶拿大学担任数学、物理学和天文学讲师，1876年任教授。1866年与C.蔡司合作研制光学仪器。这一合作有力地促进了德国光学工业的发展。阿贝后来还做了蔡司工厂的负责人。1905年1月14日在耶拿逝世。 以显微镜为中心，阿贝在光学仪器的光具组理论上，做出了两项重要贡献：一是几何光学的“正弦条件”,确定了可见光波段上显微镜分辨本领的极限，为迄今光学设计的基本依据之一；二是波动光学的显微镜二次衍射成像理论——阿贝成像原理，把物面视为复合的衍射光栅，在相干光照明下，由物面二次衍射成像。A.B.波特1906年从实验证明了这理论。这理论在近年以激光为实验条件的光学变换理论中成为基础理论之一。 在光学元件和仪器方面，他在1867年制成测焦计，1869年制成阿贝折射计及快速测定玻璃色散的分光仪。1870年后，又制成数值孔径计、高度计和比长仪等；1879年与O.肖托合作，研制成可用于整个可见光区的复消色差镜头。阿贝对天文学有很大兴趣，在他从事光学仪器的研究和设计中也改进了不少天文观察仪器，如棱镜望远镜和立体测远计等。 处理光的衍射和干涉问题，最基本的方法是研究光的相干叠加。这是传统光学的一般方法。 可以从另外一个角度分析这类问题。入射波场，遇到障碍物之后，波场中各种物理量重新分布。衍射障碍物将简单的入射场变换成了复杂的衍射场。 所以可以从障碍物对波场的变换作用，来分析衍射。 从更广义的角度，不仅仅是相干波场的障碍物，非相干系统中的一切使波场或者波面产生改变的因素，它们的作用都可以应用变换的方法处理。 一、夫琅和费光栅衍射的傅里叶频谱分析 理论上，当光源和观察点均距物体无穷远时发生的衍射称为夫琅和费衍射。实际上，若光源和观察点均离主轴非常近（即满足“傍轴条件”），在与通光孔平面平行的某平面上也可以观察到夫琅和费衍射。 1．空间频率的概念 在空间上也可以定义周期和频率，空间周期d的倒数就是空间频率，即 f 称为空间频率。 2、衍射系统的屏函数 能使波前的复振幅发生改变的物，统称为衍射屏。 衍射屏将波的空间分为前场和后场两部分。前场为照明空间，后场为衍射空间。 波在衍射屏的前后表面处的复振幅分别称为入射场、透射场（或反射场），接收屏上的复振幅为接