第03章酶2选读.pptxVIP

第 3章 酶;第三节 酶促反应动力学 Kinetics of Enzyme-Catalyzed Reaction ;酶促反应动力学：研究各种因素对酶促反应速率的影响，并加以定量的阐述。 影响因素包括：酶浓度、底物浓度、pH、温度、抑制剂、激活剂等。;一、底物浓度对反应速率影响的作图呈矩形双曲线;单底物、单产物反应； 酶促反应速率一般在规定的反应条件下，用单位时间内底物的消耗量和产物的生成量来表示； 反应速率取其初速率，即底物的消耗量很小（一般在5﹪以内）时的反应速率 底物浓度远远大于酶浓度。;[S]＝0，V＝0 [S]低，V∝ [S] [S]高至一定程度（酶达到饱和）时， V恒定。;E;;;中间产物;;E与S形成ES复合物的反应是快速平衡反应，而ES分解为E及P的反应为慢反应，反应速率取决于慢反应即 V = k3[ES]。 (1) S的总浓度远远大于E的总浓度，因此在反应的初始阶段，S的浓度可认为不变即[S] =[St]。;米－曼氏方程式推导过程：;当底物浓度很高，将酶的活性中心全部饱和时，即[Et] =[ES]，反应达最大速率 Vmax = k3[ES] = k3[Et] (5);;当反应速率为最大反应速率一半时：; Km与Vmax的意义; Vmax;定义: 当酶被底物充分饱和时，单位时间内每个酶分子催化底物转变为产物的分子数。 意义: 可用来比较每单位酶的催化能力。 ;1. 双倒数作图法(double reciprocal plot)，又称为 林-贝氏(Lineweaver- Burk)作图法;2. Hanes作图法;二、底物足够时酶浓度对反应速率的影响呈直线关系;当[S]＞＞[E]，酶可被底物饱和的情况下，反应速率与酶浓度成正比。 关系式为：V = k3 [E];三、温度对反应速率的影响具有双重性;;酶的最适温度不是酶的特征性常数，它与反应进行的时间有关。 酶的活性虽然随温度的下降而降低，但低温一般不使酶破坏。温度回升后，酶又恢复其活性。 ;四、pH通过改变酶和底物分子解离状态影响反应速率;;五、抑制剂可逆地或不可逆地降低酶促反应速率;抑制作用的类型;有机磷化合物 ?? 羟基酶 解毒 -- -- -- 解磷定(PAM) 重金属离子及砷化合物 ?? 巯基酶 解毒 -- -- -- 二巯基丙醇(BAL) ;有机磷化合物;（二） 可逆性抑制作用;竞争性抑制作用的抑制剂与底物竞争结合酶的活性中心 ;反应模式;反竞争性抑制的特性曲线;;;特点;举例;举例：;有些抑制剂与酶活性中心外的必需基团相结合，不影响酶与底物的结合，酶和底物的结合也不影响酶与抑制剂的结合。底物和抑制剂之间无竞争关系。但酶-底物-抑制剂复合物(ESI)不能进一步释放出产物。这种抑制作用称作非竞争性抑制作用。;反应模式;特点;抑制剂仅与酶和底物形成的中间产物(ES)结合，使中间产物ES的量下降。这样，既减少从中间产物转化为产物的量，也同时减少从中间产物解离出游离酶和底物的量。这种抑制作用称为反竞争性抑制作用。;反应模式;特点：;各种可逆性抑制作用的比较 ;竞交Y,非交X,反平行;六、激活剂可加快酶促反应速率;第五节  酶的命名与分类The Naming and Classification of Enzyme;一、酶可根据其催化的反应类型予以分类;二、每一种酶均有其系统名称和推荐名称;酶的分类;第六节酶与医学的关系The Relation of Enzyme and Medicine;一、酶和疾病密切相关 ;（二）酶的测定有助于对许多疾病的诊断;在特定的条件下，每分钟催化1μmol底物转化为产物所需的酶量为一个国际单位。 ; 2．血清酶对某些疾病的诊断具有更重要的价值;（三）酶和某些疾病的治疗关系密切;二、酶在医学上的应用领域广泛;2．酶标??测定法是酶学与免疫学相结合的一种测定方法;3．工具酶广泛地应用于分子克隆领域;（二）酶的分子工程是方兴未艾的酶工程学;1．固定化酶是固相酶 ; 2．抗体酶是具有酶活性的抗体;谢谢！