肾脏病电子显微镜检查-1.ppt

2.膜性肾病 ★病变特点： 光镜下可见肾小球基底膜弥漫增厚； 免疫病理检查可见IgG和C3沿基底膜细颗粒状沉积； 电镜下可见电子致密物在基底膜的不同部位沉积。 Ⅰ期：肾小球基底膜基本正常，仅见上皮下少量电子致密物沉积。足细胞足突融合。 Ⅱ期：肾小球上皮下多数排列有序的电子致密物沉积，基底膜在电子致密物之间钉突状增生。足细胞足突弥漫融合。 ★膜性肾病依据电镜下特点分为五期： Ⅲ期：肾小球基底膜内多数电子致密物沉积，电子致密物周围大量基底膜增生，系膜基质增生。足细胞足突弥漫融合。 Ⅳ期：不同部位沉积的电子致密物溶解吸收，使基底膜呈不规则的虫蚀状。部分患者基底膜增厚，系膜基质增多，呈硬化状态。足细胞足突融合。 Ⅴ期：肾小球形态基本恢复正常。 3.毛细血管内增生性肾小球肾炎 又称急性链球菌感染后肾炎，多见于5~10岁发病，很少累及中老年人。2岁以下也较少（少于50%）。基本病变为弥漫性毛细血管袢和系膜区细胞增生肿胀（内皮及系膜细胞）和炎症细胞浸润。增生的细胞可使毛细血管腔闭锁。根据病程的变迁可略分为渗出期、增生期、增生硬化期及硬化期四个阶段。典型病例见上皮下电子致密物形成驼峰状。 4.系膜增生性肾小球肾炎 电镜下该病具有与光镜相应的弥漫性系膜增殖性病变，包括系膜细胞增生、基质增多，大部分在系膜区可以出现散在或者均匀的细颗粒状电子致密物，部分在系膜区可见边界不清的沉积物、透明带、小空泡或者纹状膜结构，上皮细胞足突肿胀，出现阶段性或者弥漫性足突消失、融合；基膜一般正常。 5.局灶性、节段性肾小球硬化 电镜下大部分肾小球显示广泛足突融合及足突微绒毛化，硬化部位见毛细血管袢萎陷，内皮细胞减少，基底膜节段性皱缩、增厚，系膜基质增多，电子致密物沉积。 * 肾脏病电子显微镜检查 Shenzangbingxue 主要内容 ◎ 电子显微镜概述 ◎ 肾脏于电镜下观察的主要内容 ◎ 肾小球正常的超微结构及其常见病理改变 ◎ 常见几种原发性肾小球疾病的电镜表现 ◎ 其他肾小球疾病的特征性电镜下表现 ◎ 肾脏病电镜检查的意义 电子显微镜（EM） ? 电子显微镜是根据电子光学原理，用电子束和电子透镜代替光束和光学透镜，使物质的细微结构在非常高的放大倍数下成像的仪器。 ? 20世纪70年代，透射式电子显微镜的分辨率约为0.3纳米（人眼的分辨本领约为0.2毫米）。 ? 现在电子显微镜最大放大倍率超过300万倍，而光学显微镜的最大放大倍率约为2000倍。 光学显微镜与电子显微镜比较 电镜技术应用的进展 √电镜诞生于30年代初,但直到60年代以前,电镜在生物医学中的应用主要限于细胞生物学、微生物、实验病理学等研究领域。60年代初期人们开始将电子显微镜应用于人体病理标本,通过对这些人体病理标本的超微结构分析,进一步了解了疾病的病理变化及其发生机制,为某些疾病的诊断提供重要的形态依据。 √电子显微镜在肾活检诊断、疑难肿瘤的病理诊断、感染性疾病(病毒性,细菌性等)、代谢性疾病(贮积性疾病)、细胞外物质沉积性疾病(如淀粉样变性)、组织细胞增生症(郎格罕细胞增生性疾病)、纤毛不能运动综合征等特殊疾病的诊断中公认起着重要的作用。 电子显微镜在医学中的应用 诊断电镜学 肿瘤诊断 病毒诊断 肾活检 心肌活检 肝活检 肌肉活检 遗传性疾病 基础医学研究 超微结构学 超微病理学 电镜细胞活血 免疫电镜 定性定量研究 交叉学科（医工结合）研究 纳米医药新技术 电镜的分类 1.透射电镜（超高压电子显微镜、高压电子显微镜、高分辨率电子显微镜、普及型电子显微镜、简易型电子显微镜）：电子束透过样品（透射电子）直接放大成像 → 内部结构 2.扫描电镜：电子束以扫描形式轰击在样品上，产生二次电子等信息，而后再将二次电子等信息收集起来放大成像。→ 表面超微结构 3.分析电子显微镜：将X射线和显微分析仪与扫描电镜或透射电镜相连，常见的是能谱仪和波谱仪。 ★免疫电镜：是免疫组织化学与透射电镜相结合的方法。 透射电子显微镜 （TEM，Transmission Electron Microscope） ? TEM是以电子束为照明源，电子束穿透样品，在穿过样品时电子束被标上了样品的信息，经多级放大后在荧光屏上成像的大型仪器。产生的图像是平面的，它要求样品极薄，因此样品必须备成50-70nm的超薄切片。 扫描电子显微镜 （SEM，Scanning Electron Microscope） ? SEM是利用电子束在样品表面扫描激发出来代表样品表面特征的信号成像的。主要用来作微形貌观察、显微成分分析。分辨率可达到1nm，放大倍数可达5×105倍。 TEM样品制备 取材 固定（戊二醛和锇酸） 脱水 浸透、包埋 超薄切片 染色（枸橼酸铅和醋酸铀） SEM样品制备