第三章染色体与基因.ppt

组蛋白基因：组蛋白基因在各种生物体内重复的次数不一样，但都在中度重复的范围内。 2.3 高度重复序列（highly repetitive DNA） 卫星DNA(satelliteDNA)是一类高度重复序列DNA。在氯化铯梯度离心中，DNA分子将按其大小分布在离心管内不同密度的氯化 铯介质中，不同层面的DNA形成了不同的条带。根据荧光强度的分析，可以看到在一条主带以外还有一个或多个小的卫星带。这些在卫星带中的DNA即被称为卫星DNA，这种DNA的GC含量一般少于主带中的DNA，浮力密度也低。 原位杂交显示着丝粒卫星DNA 卫星DNA位于有重要功能的真核染色体的着丝粒和端粒上 卫星DNA按其重复单元的核苷酸的多少可以分成： 小卫星DNA(minisatelliteDNA)： 由几百个核苷酸对的单元重复组成。 微卫星DNA(microsatelliteDNA)： 由2个到20个左右的核苷酸对的单元重复成百上千次所组成 微卫星DNA和小卫星DNA具有高度的可变性，不同个体彼此不同。但它们中有一小段序列则在所有个体中都一样，称为“核心序列”。如果把核心序列串联起来作为分子探针，与不同个体的DNA进行分子杂交，就会呈现出各自特有的杂交图谱，它们与人的指纹一样，具有专一性和特征性，因人而异，因此被称作“DNA指纹”(DNA fingerprint)。 DNA指纹分析：将个体的染色体DNA用限制性内切酶消化，再以重复序列中的共有序列作为核酸探针进行杂交，对所得到不同生物个体相似DNA片段的带型图谱（即DNA指纹图谱，对每一个体都是独特的）进行分析的方法。 法医鉴定 亲子鉴定 遇难者辨识 空难事故受难者残骸鉴定 通常在空难受害者残骸的鉴定过程中，单纯依靠法医学和常规法血清学检验，是很难对所有遇难人员的残骸加以区分的。因此，在常规手段行不通时，再采用DNA 指纹术实为一种最佳选择。 人种、性别鉴定 人种、性别鉴定 英国内政部中央研究局研究表明，DNA 指纹术可在相当大程度上用于人种鉴定，并测出白种人和非洲黑人的DNA多态片段及它在特定范围内的出现频率，具有种属代表性。有人对长达20年的陈旧血迹中的降解DNA进行了性别鉴定，并在人、兽的区分鉴定中取得成功。 其它方面的应用 鉴别双胞胎是异卵双生还是同卵双生。 可用于器官移植的配型试验，以便筛选出最佳供体。 肿瘤细胞DNA指纹，因其染色体丢失或异常的扩增而与正常体细胞不同。肿瘤DNA 指纹的改变可用作肿瘤发生和发展的标志。 在盗杀和偷捕野生动物的案件中，可对被盗杀的动物进行鉴定。 真核生物基因的特点： 3.1 断裂基因（splite gene）/间隔基因（interrupted gene） 概念：真核生物结构基因，由若干个编码区（外显子）和非编码区（内含子）互相间隔开但又连续镶嵌而成，去除非编码区再连接后，可翻译出由连续氨基酸组成的完整蛋白质，这些基因称为断裂基因。 断裂基因的发现与证实 1977年以前法国科学家Pierre Chambon发现： 鸡的管状细胞DNA与红细胞DNA Hind III和EcoR I 以鸡卵清蛋白cDNA为探针 Southern 杂交分析 出现三条杂交条带？ mRNA DNA 实例：鸡卵清蛋白基因的大小和结构如下 A、B、C、D、E、F、G的序列不能转录，约占75.2%(5641bp) L、1、2、3、4、5、6、7的序列能够转录，约占24.8%(1859bp) 鸡卵清蛋白mRNA与DNA杂交实验 电子显微镜照片 根据对微球菌核酸酶（micrococcal nuclease）的敏感性不同，核小体DNA可以分成两部分： ----核心DNA（Core DNA）：长度固定为146bp，对核酸酶的消化相对稳定。 ----连接DNA（Linker DNA）：组成剩余的重复片段，长度大小不一，每个核小体中有8bp到114bp。 不同生物核小体全长的变化由连接DNA长度改变引起。 染色体的三个关键因素 3.1 自主复制DNA序列（autonomously replicating sequence，ARS ） 20世纪70年代末首次在酵母中发现。它是在真核生物中发现的一类能启动DNA复制的序列，含有一个AT富集区。具有一个复制起始点，能确保染色体在细胞周期中能够自我复制，从而保证染色体在世代传递中具有稳定性和连续性。 3.2 着丝粒DNA序列（centromere DNA sequence） 着丝粒是染色体分离的一种装置，也是姐妹染色单体在分开前相互联结的位置，在染色体的形态上表现为一个缢痕 。 着丝粒DNA序列由三个功能区组成： 为染色体的分离提供动力 中期两条染色单体在此处相互连结 若着丝粒丢失了，