第七章微生物遗传变异本科.ppt

本章目录 第一节 微生物的突变 第二节 细菌的基因重组 第三节 真核微生物的基因重组 第四节 微生物遗传变异知识的应用 第五节 菌种的衰退、复壮和保藏 第一节 微生物的突变 一 突变体主要类型 二 基因突变的特点 三 基因突变的机制 四 紫外线对DNA的损伤及其修复 １营养缺陷型 auxotroph 指由于基因突变引起代谢过程中失去合成某种酶的能力，而无法合成某种必须的生长物质的突变型，只有加入相应的生长物质才能正常生长的变异菌株。 ２抗性突变型 是一类能抵抗有害理化因素的突变型。据其抵抗的对象可分抗药性、抗紫外线或抗噬菌体等突变类型。它在遗传学基本理论的研究中十分有用,常作为选择性标记菌种。３发酵突变型 指从能够利用到不能够利用某种营养物质的突变型。 4 毒力突变型 指突变后致病力增强或减弱的突变型。 5 产量突变型 指产生某种代谢产物的能力增强或减弱的突变型。 (三)条件致死突变型--某菌株或病毒经基因突变后,在某种条件下可正常生长、繁殖并实现其表型,而在另一条件下却无法生长、繁殖的突变类型。温度敏感突变株(temperature-sensitive mutant, Ts突变株)是一类典型的条件致死突变株。例如,E.coli的某些菌株可在37℃下正常生长,却不能在42℃下生长等。某些T4噬菌体突变株在25℃下有感染力, 而在37℃下则失去感染力等。产生Ts突变的原因是突变引起了某些重要蛋白质的结构和功能改变,以致在某特定的温度下能发挥其功能,而在另一温度(一般为较高温度)下则该功能丧失。 (四)致死突变型--由于基因突变而导致个体死亡的突变型。 5、稳定性 stability 突变后产生的变异性是稳定的，可遗传的。 6 可诱变性 自发突变的频率可因诱变剂的影响而大大提高。 1 互变异构 通常以氨基式出现的腺嘌呤(A)与胸腺嘧啶(T)配对，当DNA复制到这一位置瞬间时转变为稀有的亚氨基式(A＊)(互变异构现象，tautoomerism)，就会与胞嘧啶(C)碱基配对，这意味着一个胞嘧啶(C)插入DNA，代替了胸腺密啶(T)。假如在下一次复制周期前不被修复A-T碱基对将变为C-G碱基对。 2 化学诱变剂引起的碱基对置换 碱基类似物(base analogs) 　如5-溴尿嘧啶和2-氨基嘌呤。５－ＢＵ的结构与Ｔ相似，当被掺入DNA分子本身对细菌无影响，但5-BU有酮式和烯醇式的互变且出现烯醇式的的机会多，当5-BU为烯醇式时,与G配对而不与A配对。这时增加了ＡＴ转换为ＧＣ的频率。 第二节 　　细菌的基因重组 一　转化 二 转导 三 接合 四 原生质体融合 第三节、真核微生物的基因重组 一 有性生殖 二 准性生殖 一 诱变育种 指利用各种诱变剂处理微生物细胞，提高基因的随机突变频率，通过一定的筛选方法获得所需要的高产优质菌株。 1、诱变育种的一般方法 （1） 出发菌株的诱变处理 A 出发菌株的选择 出发菌株是用于诱变育种的原始菌株。 选择原则是：具有有利性状和对诱变剂敏感。 选择时期是：应选择菌体的对数期，孢子和芽孢的萌发前期。 选择对象是：孢子和芽孢 诱变剂的选择 选择最适诱变剂量 B 诱变剂的选择 选择原则是：方便性和有效性。 应用较多的有：紫外线、亚硝酸、N-甲基-N-硝基-N-亚硝基胍（NTG）、亚硝基甲基脲（NMU）等。 C 选择最适诱变剂量 常以杀菌率表示其相对剂量。采用杀菌率为30%~75%的相对剂量，容易出现更多的突变。 完全培养基：在基本培养基中添加天然物质后能满足某种微生物各种营养缺陷型的营养要求的加富培养基。 补充培养基：在基本培养基中添加某种营养物质以满足该营养物质缺陷型菌株生长需求的加富培养基。 微生物学与基因工程的关系 （1）基因工程所用克隆载体主要是用病毒、噬菌体和质粒改造而成； （2）基因工程所用千余种工具酶绝大多数是从微生物中分离纯化得到； （3）微生物细胞是基因克隆的宿主，即使植物基因工程和动物基因工程也要先构建穿梭载体，使外源基因或重组体DNA在大肠杆菌中得到克隆并进行拼接和改造，才能再转移到植物和动物细胞中； （4）大规模表达各种基因产物，通常都是将外源基因表达载体导入大肠杆菌或是酵母中构建成工程菌，利用工厂发酵来实现； （5）微生物的多样性，尤其是抗高温、高盐、高碱、低温等基因，为基因工程提供极其丰富而独特的基因资源； （6）有关基因结构、性质和表达调控的理论主要也是来自对微生物的研究中取得，因此微生物学不仅为基因工程提供了操作技术同时也提供了理论指导。 菌种衰退的表现