抗酸染色液染色原理及作用.doc

抗酸染色液染色原理及作用 抗酸染色法acid－fast staining method 1882年由埃利希（F．Ehrlich）首创并经F．Ehrlich）齐尔（Ziehl）改进而创造出的细菌染色法。其中最具代表性的为对结核菌的齐尔-尼尔森（Ziehl－Neelsen）染色法和齐尔-加贝特（Ziehl－Gabbet）染色法。用石炭酸复红染色后，用盐酸乙醇分色，再用美蓝进行对比染色，即不再脱色而呈现石炭酸复红的红色。 抗酸染色的原理： 分枝杆菌的细胞壁内含有大量的脂质，包围在肽聚糖的外面，所以分枝杆菌一般不易着色，要经过加热和延长染色时间来促使其着色。但分枝杆菌中的分枝菌酸与染料结合后，就很难被酸性脱色剂脱色，故名抗酸染色。 齐-尼氏抗酸染色法是在加热条件下使分枝菌酸与石炭酸复红牢固结合成复合物，用盐酸酒精处理也不脱色。当再加碱性美兰复染后，分枝杆菌仍然为红色，而其他细菌及背景中的物质为蓝色。 抗酸染色的染液配制： 1、石炭酸复红 碱性复红酒精饱和溶液 10mL 5%石炭酸 90mL 2、3%盐酸酒精 浓盐酸 3mL 95%酒精 97mL 3、吕氏美兰液 美兰酒精饱和液 30mL 氢氧化钾（1:10000） 100mL 染色结果： 抗酸菌被染成红色，为抗酸阳性；其它细菌染成蓝色，为抗酸阴性。背景细胞及杂质也被染成蓝色。 注意事项： 1.染色程度可通过改变染色时间或染色温度做适当调整。 2.每次试剂用完后，请迅速盖好，以免挥发。 3.石炭酸对皮肤、粘膜有强列刺激性和腐蚀性，使用时请穿实验服并戴一次性手套操作。