钝齿棒杆菌N-乙酰谷氨酸激酶基因的克隆、序列分析及表达.pdfVIP

钝齿棒杆菌N-乙酰谷氨酸激酶基因的克隆、序列分析及表达.pdf

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钝齿棒杆菌N-乙酰谷氨酸激酶基因的克隆、序列分析及表达

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 !(): # % ’ ! 年 月 日 $%% $ ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! ()*+,-+. $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 钝齿棒杆菌 乙酰谷氨酸激酶基因的克隆、序列分析及表达 ! , # $ # # # # 郝 宁 ,赵 智 ,王 宇 ,张英姿 ,丁久元 # (中国科学院微生物研究所 北京 #%%%1% ) $ (中国科学院研究生院 北京 #%%%! ) 摘 要:以钝齿棒杆菌( )野生株 及产精氨酸突变株 的基因组为模板,用 !#$%’()*#+,- )#%(*,- DE #F3!$ ?#F # GHI 方法扩增出 乙酰谷氨酸激酶基因( )片段。核酸序列分析结果表明,该片段全长 ,包含一个 ,推测 J2 (#./ #3%3*K LI( 此 区编码一条 个氨基酸的多肽,分子量为 。 野生株 与突变株 的 LI( C#? CC FMN- ! = )#%(*,- DE #F3!$ ?#F # (#./ 基因序列比较,发现只在结构区有一个核苷酸的差别但没有引起氨基酸变化。野生株DE #F3!$ (#./ 基因的编码 区核苷酸序列与 、 和 的同源性分别是 ! = .0,*(-+),- D/HH #C%C$ !#$%’()*#+,- 11 +)+%2 OE2C#! 32)4#+)4+( )0+ M#$ 、 和 ,而氨基酸同源性分别是 、 和 。在 基因上游存在 F1 P ? F$ P C? F! P #%% P ?1 F33 P $3 F$3 P ! = )#%(*,- (#./ 启动子区域。经QG/R 诱导该基因在棒杆菌中得到有效表达,野生株DE #F3!$ 为宿主的重组子酶活明显提高。突 变株?#F # 为宿主的重组菌酶活提高一倍,精氨酸积累提高约$3 P 。 关键词:钝齿棒杆菌; 乙酰谷氨酸激酶;克隆;表达 J2 中图分类号: 文献标识码: 文章编号: ( ) S?1

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