气虚血瘀证卵巢癌动物模型的建立与其生物学特性.pdfVIP

全国第五次中医妇科学术研讨会 2．2两组阴道流血量的比较(见表1) 注：两组比较，P0．05 2．3两组清宫情况比较治疗组清宫6例(占5．0％)，其中4例系阴道流血量大于月经量的2倍，2例 阴道流血20天。两组比较有显著差异(P0．05=。 3讨论 3．1米非司酮为受体水平的孕酮拮抗剂，主要与体内孕酮争夺受体而拮抗孕酮活体，导致蜕膜及绒毛变 性、初雪、坏死，继而引起内源性前列腺素释放，诱发宫缩及宫颈软化；米索前列醇为前列腺素E·衍生 物，有较强的促宫颈成熟及宫缩作用，两药配伍促使绒毛排出，达到流产的目的。但绒毛球排出后，变 性的蜕膜组织不能一次完全排出，致使阴道流血量较多、流血时间较长。次并发症的存在在一定程度上 限制了药物流产的广泛应用。 3．2女金胶囊是以当归、白芍、川芎、熟地黄、党参、白术(炒)、茯苓、甘草、肉桂、益母草、丹皮、 没药等23味中药为原料制成的中成药，具有活血化瘀、调摄冲任、温肾、养血调经、补中健脾等作用。 我们将女金胶囊用于药物完全流产的患者，并采用大样本进行临床观察，结果治疗组阴道流血天数比对 照组明显缩短，阴道流血多于月经量的发生率显著降低清宫率明显减少。提示：女金胶囊用于药物流产 后阴道流血有较好的治疗作用，值得推广应用。 气虚血瘀证卵巢癌动物模型的建立及其生物学特性 齐聪 张勤华 上海中医药大学附属曙光医院妇科 免疫系统的失调及血瘀证的产生既是肿瘤导致的结果，也是促进肿瘤发展与转移的因素，在肿瘤发 生发展的各阶段有着不同的变化。既往我们采用的DMBA诱发的原发性卵巢癌模型，虽也存在T细胞 亚群失调及高粘滞血证的指标的变化，但往往“瘤”现“证”后，或有“瘤”无“证”，不能很好的反映 免疫功能及血瘀证对卵巢癌形成的影响。因此，我们根据中医“气为血帅”“脾虚则气弱”“气虚则血瘀” 的理论，以大黄芒硝合剂长期喂养动物，造成慢性(脾)气虚血瘀证，并以致癌剂二甲基苯蒽(DMBA) 埋线法诱发原发性卵巢癌，建立和卵巢癌的气虚血瘀证模型，并对其生物特性进行研究。 1一般材料 1．2药物：①大黄芒硝合剂：大黄煎煮去渣，与芒硝按照4：l的比例，浓缩成0．59／m1升药浓度备用。 (药量按成人每公斤体重的20倍计算)②治癌剂二甲基苯葸(D她A)购自Sigma公司。 1．3主要试剂：外周血T淋巴细胞活性检测试剂：由北京健尔康医疗设备有限公司提供。红细胞免疫检 测试剂：致敏及未致敏酵母冻干剂，第二军医大学长海医院免疫室提供。 1．4主要仪器：KL型肿瘤免疫图象分析系统，北京健尔康医疗仪器设备公司产品。 2 实验方法： 61 全国第五次中医妇科学术研讨会 2．1原发卵巢癌造模(1)：大鼠适应性喂养2周后，乙醚麻醉下，取中下腹正中切口，沿左侧子宫找到 左侧卵巢，将预先制好的二甲基苯葸药线埋入大鼠卵巢内，打结固定，使粘上DMl3A的线结牢牢固定了二卵 巢实质内，关腹，待大鼠清醒后放回笼中饲养。 2．2动物分组及给药处理：造模后静养两周，后随机分为三组，A组50只常规饲养；B组50只常规饮食 外每}]予以大黄芒硝合剂灌胃4m]，每日1次，连续2周；c组50只常规饮食外每日予以大黄芒硝合剂 灌冒2m]／曰，连续4周，继之以2ml／隔日，连续4周，共8周。 2．3观察项目及检测方法 2．3．1一般观察：每周测量大鼠体重，绘制体重增长曲线。观察大鼠毛发、饮食、排泄、活动情况。 2．3．2肿瘤生长情况及转移情况观察：在造模20周以后每周腹部触诊检查大鼠肿瘤发生情况，35周全部 处死剖腹探查。比较平均成瘤时间，肿瘤发生率、转移及腹水发生率，35周之前死亡的当即剖腹探查。 按照试剂说明书进行操作制成涂片，置于KL型图像分析仪上，由计算机自动完成图像处理并测}f{30个 T淋巴细胞核仁银染强度的平均值，以核仁银染面积(S核仁)与细胞核面积(S核)的比值来表示。 2．3．4血夜流变学检测：抽血时间同上，抽血3ml，放入125u／ml肝素抗凝管混匀，室温下，4h内测定。 毛细管法测定红细胞压积(HCT)、血沉(ESR)；血浆纤维蛋白原采用双缩脲法检测。 2．3．5红细胞免疫功能检测：抽血时间同上，取血0．5ml，方法按照郭峰红细胞免疫黏附酵母菌花环法[2】， 显微镜下油镜观察，以红细胞上1个或以上酵母菌算一个花环，计数100个红细胞的花环率。 2．3．6肿瘤病理学检测：HE染色，石蜡包埋，切片，光学