高效液相色谱流动相的选择.pptVIP

（1）液相色谱的流动相根据作用可分为底剂和洗脱剂。底剂决定基本的色谱分离情况，洗脱剂对某几个组分选择分离。流动相组成改变，极性改变，可显著改变组分分离状况； （2）亲水性固定液常采用疏水性流动相，即流动相的极性小于固定相的极性，称为正相液液色谱法，极性柱也称正相柱。正相柱的底剂用低极性溶剂，洗脱剂则选用极性较强的针对性溶剂。 （3）若流动相的极性大于固定液的极性，则称为反相液液色谱，非极性柱也称为反相柱。组分在两种类型分离柱上的出峰顺序相反。反相柱通常以水为流动相的主体，再加入不同配比的有机溶剂做调节剂。 按流动相组成分：单组分和多组分； 按极性分：极性、弱极性、非极性； 按使用方式分：固定组成淋洗和梯度淋洗。 常用溶剂：己烷、四氯化碳、甲苯、乙酸乙酯、乙醇、 乙腈、水。 采用二元或多元组合溶剂作为流动相可以灵活调节流动 相的极性或增加选择性，以改进分离或调整出峰时间。 在选择溶剂时，溶剂的极性是选择的重要依据。 采用正相液-液分配分离时：首先选择中等极性溶剂，若组分的保留时间太短，降低溶剂极性，反之增加。也可在低极性溶剂中，逐渐增加其中的极性溶剂，使保留时间缩短。 常用溶剂的极性顺序： 水(最大) 甲酰胺 乙腈 甲醇 乙醇 丙醇 丙酮 二氧六环 四氢呋喃 甲乙酮 正丁醇 乙酸乙酯 乙醚 异丙醚 二氯甲烷氯仿溴乙烷苯四氯化碳二硫化碳环己烷己烷煤油(最小) 为获得合适的强度常采用二元或多元的组合溶剂 （1）尽量使用高纯度试剂作流动相，防止微量杂质长期累积损坏色谱柱和使检测器噪声增加。 （2）避免使用会引起柱效损失或保留特性变化的溶剂。在液—液色谱中，流动相与固定性不互溶，否则固定性流失，柱的保留特性改变。 （3）试样在流动相中应有适宜的溶解度，防止产生沉淀并在柱头沉积。 （ 5）流动相同时还应满足检测器的要求。当使用紫外检测器时，流动相不应有紫外吸收。 （4）溶剂的黏度小些为好，黏度大降低组分的扩散系数，造成柱效下降，温度相同柱压随着黏度的增加而增加。