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卷 期 生 物 工 程 学 报
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年 月
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头状链轮丝菌染色体复制起始区的克隆和对变铅青链霉菌的转化
马 伟 茅 翔 卢 捷 姜卫红 焦瑞身 覃重军 赵国屏
（中国科学院上海生命科学研究院，植物生理生态研究所，上海 $%%%3$ ）
摘 要 头状链轮丝菌（ ） 是抗肿瘤药物———丝裂霉素 的产生菌，根据高
3/*%4/(5%*/#0#,,)6 0+%4 #/() L4NN$15$$ L FN
含量革兰氏阳性菌染色体复制起始区两端基因序列的保守性，采用ONP 方法从该菌中克隆了一段包含染色体复制
起始区（ ）的 片段。序列分析发现，克隆片段与天蓝色链霉菌的 及邻近区域的同源性达 以上；
(*#! !Q3 H. (*#! % R
头状链轮丝菌 中含有 个 ，保守序列为 。以克隆片段构建的质粒可以跨属转化变铅青
(*#! $$ S8L0.’6 44F4NNLNL
链霉菌（ ） ，原生质体转化效率为 $ 个 ；质粒在 中能以低拷贝形式稳定
3 ) ,#5#7+$ TU1 3 Q$ V !% I ?S*L 3 ) ,#5#7+$ TU1
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存在；转化子的菌落和菌丝形态均正常。头状链轮丝菌 (*#! 序列与几种链霉菌的(*#! 有较高的同源性，以及在变
铅青链霉菌中仍具有复制起始活性等说明链轮丝菌属与链霉菌属在系统发生上关系较近；但采用最大似然法分析
(*#! 序列构建的头状链轮丝菌与几种链霉菌的系统进化树表明，头状链轮丝菌与几种链霉菌之间的分化距离远大
于链霉菌之间的分化距离。该证据支持链轮丝菌属的独立分属。
关键词 头状链轮丝菌，复制起始区（ ），跨属复制起始活性
(*#!
中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ）
W19 L !%%%03%#! $%%$ %#0%##$0%9
染色体复制起始区（ ）是涉及 复制起 守序列分别设计简并引物，成功地克隆了包括
(*#! S*L 3 )
始发生的一段序列， 复制复合体装配，双链 在内的 种链霉菌的复制起始
S*L +$/#:#(/#0) :4Y159! 3
［］
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