分子生物学许晓东8.ppt

8 基因的表达与调控（下） ——真核基因表达调控一般规律;真核基因的表达调控的特点： 原核细胞——环境因素对调控起决定性的作用。群体中每一个细胞对环境变化的反应是直接的和一致的。 真核细胞——基因表达调控最明显的特征是在特定时间，特定的细胞中特定的基因被激活，实现“预定”的、有序的、不可逆转的分化、发育，并使生物的组织和器官保持正常功能。这是生命活动规律决定的，环境因素在其中作用不大。;真核生物基因调控可分为两大类： 第一类是瞬时调控或称可逆性调控，它相当于原核细胞对环境条件变化所做出的反应，包括某种底物或激素水平升降，或细胞周期不同阶段酶活性的调节； 第二类是发育调控或称不可逆调控，是真核基因调控的精髓部分，决定了真核细胞生长、分化、发育的进程。 根据基因调控发生的先后次序，又可分为： 转录水平调控 转录后水平调控（RNA加工成熟过程的调控，翻译水平的调控，蛋白质加工水平的调控）。;研究基因调控的三个主要内容： 诱发基因转录的信号？ 基因调控在哪一步（模板DNA的转录、mRNA的成熟或蛋白质合成）实现的？ 不同水平基因调控的分子机制什么？;本章内容： 真核生物的基因结构与转录活性 真核基因转录机器的主要组成 蛋白质磷酸化对基因转录的调控 蛋白质乙酰化对基因表达的影响 激素与热激蛋白对基因表达的影响 其他水平上的表达调控;8.1 真核生物的基因结构与转录活性;在原核生物中，转录的调节区都很小，大都位于转录起始位点上游不远处，调控蛋白结合到调节位点上可直接促进或抑制RNA聚合酶对它的结合。在真核生物中，基因转录的调节区则大得多，它们可能远离核心启动子达几百个甚至上千个碱基对。 真核生物的RNA在细胞核中合成，只有经转运穿过核膜，到达细胞质后，才能被翻译成蛋白质。原核生物中不存在这样严格的空间间隔。 许多真核生物的基因只有经过复杂的成熟和剪接过程，才能被顺利地翻译成蛋白质。 ;8.1.1 基因家族;;;简单多基因家族 简单多基因家族中的基因一般以串联方式前后相连。;在真核生物中，前rRNA转录产物的分子量为45S，（约有14 000个核苷酸），包括18S，28S和5.8S三个主要rRNA分子。;复杂多基因家族 复杂多基因家族一般由几个相关基因家族构成，基因家族之间由间隔序列隔开，并作为独立的转录单位。 海胆组蛋白基因家族：编码不同组蛋白的基因处于一个约为6 000bp的片段中，分别被间隔序列所隔开。这5个基因组成的串联单位在整个海胆基因组中可能重复多达1 000次。;发育调控的复杂多基因家族;延伸- 假基因（Pseudogene）是指脱氧核糖核酸（DNA）的碱基序列中，一段与其他生物体内已知的基因序列非常相似的片段。但是这个片段无法发挥原有的基因功能，也就是无法制造出蛋白质。 这种基因片段是来自演化过程中的突变累积，有些无法转录，有些则是转录不完全。有些虽然能够转录完成，但是也会在转译阶段途中终止作用。;8.1.2 真核基因的断裂结构;哺乳动物二氢叶酸还原酶基因，全长25-31kb左右，但其6个外显子总长只有2kb;内含子的生理功能还不清楚。 有些基因除去内含子后可以产生有活性的mRNA。 有些基因一旦出去内含子，mRNA运入细胞质的过程就被阻断。 内含子的存在可能有利于生物进化。;2. 外显子与内含子的连结区 断裂结构的一个重要特点是外显子-内含子连接区的高度保守性和特异性碱基序列。 序列分析表明，几乎每个内含子5‘ 端起始的两个碱基都是GT，而3’ 端最后两个碱基总是AG，由于这两个碱基的高度保守性和广泛性，有人把它称为GT-AG法则。（线粒体基因和酵母tRNA基因例外）;3. 外显子与内含子的可变调控 真核基因的原始转录产物可通过不同的剪接产生不同的mRNA，翻译成不同的蛋白质。有些真核基因，如肌红蛋白重链基因虽有41个外显子，却能精确地剪接成一个成熟的mRNA，我们称这种方式为组成型剪接。一个基因的转录产物通过组成型剪接只能产生一种成熟的mRNA，编码一个多肽。 有些基因选择了不同的启动子，或者选择了不同的polyA位点而使原始转录物具有不同的二级结构，产生不同的mRNA分子。同一基因的转录产物由于不同的剪接方式形成不同mRNA的过程称为选择性剪接。 ;;8.1.3 真核DNA水平上的基因表达调控;1. “开放”型活性染色质结构对转录的影响;2. 基因扩增 基因扩增是指某些基因的拷贝数专一性大量增加的现象，它使细胞在短期内产生大量的基因产物以满足生长发育的需要，是基因活性调控的一种方式。 非洲爪蟾的卵母细胞中原有rRNA基因（rDNA）约500个拷贝，在减数分裂粗线期，基因开始迅速复制，到双线期拷贝数约为200万个，扩增近4000倍，可用于合成1012个核糖体。 ;3. 基因重排与变换 将一个基因从远离启动子的