夜来香Dof基因与其启动子的克隆.pdfVIP

热带作物学报 2013，34(2)：301—307 ChineseJournalofTropicalCrops 夜来香D 基因及其启动子的克隆 吕恃衡，陈桂信，郑鸿 昌，潘东明 福建农林大学园艺产品贮存保鲜研究所 ，福建福州 350002 摘 要 为探究夜来香生物钟 的调控机制 ．本研究从花瓣均一化 cDNA 文库 EST序列 中获得 Do厂基 因的部分 cDNA序列．通过 RACE获得Do厂基 因的全长 cDNA，命名为CnDof，在此基础上，采用APA—Genomicwalking 技术 ，分离获得该基 因的启动子 ．启动子长度为 2054bp，通过在线软件 PlantCare分析顺式作用元件 。结果表 明：该基 因全长 cDNA为 2087bp，ORF为 1530bp，编码一条含 510个氨基酸的多肽链 ，在该多肽链 的N端 有典型 Dof结构域 ，可初步推断 。该基 因是 Dof的同源基 因；所获得 的启动子 中含有大量与光反应相关的元件 ， 可初步推测 ．Do，’基因可能参与夜来香生物钟 的调控 。 关键词 夜来香 ；D0厂基因；启动子 ；生物钟 中图分类号 Q949．777．7 文献标识码 A Cloning 0fDoF Gene and ItsPromoterfrom Cestrum Nocturnum LtiShiheng，CHEN Guixin，ZHENG Hongchang，PAN Dongming InstituteofStorageScienceandTechnologyofHorticulturalProducts，Fujina Univesityof Agricuhureand Forestry,Fuzhou，凡 m 350002，China Abstract In orderto study themechanism ofcircadian clock，aDofgenewascloned from Cestrum Nocturnum byRACE techniquebasedEST from anormalizedcDNA library，named CnDof．Theresultofsequencing indicated thatthe full-length ofcDNA was2087bpwithanopenreadingflame1530bp．ThecDNAwasdeduced to encode510aminoacidscontainingatypicalDofdomainnearN terminus．Th egenewasidentifiedasaDOFhomologous genepreliminarily．The2054bpDofpromoterwas cloned based on the cDNA sequence by APA—genomewalking · PCR．The promotersequencewasanalyzed by online software PlantCare and some regulatory elementswere found tobeinvolvedin lightresponsiveness．ItwasspeculatedthatCnDofmightbeinvolved inthecircadianclock regulation in Cestrum Nocturnum． Keywords Cestrum Nocturnum；Dofgene；Promoter；Circadianclock doi 10．3969／j．issn．1000—2561．2013．02．019 生物钟是植物在进化过程中形成适应环境变化 够与多种植物特异性启动子结合 ．说明Do厂基因参 的各种内在生理节律，是使植物的新陈代谢、生理 与高等植物复杂的转录调控过程、植物的防御反 状态与外界节律保持 同步 的内在机制 夜来香 应、光反应、激素响应