大学生物学课件 模块二 培养基制备技术.pptVIP

3.5.3 选择性培养基： 是根据某种或某一类群微生物的特殊营养需要（投其所好），或根据对某种化合物的敏感性情况（取其所抗）而设计出来的一类培养基。 具体说，是加入相应的特殊营养物质或有抑菌性的化学物质, 以抑制不需要的微生物的生长,而促进所需微生物的生长。 用于将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中 分离出来. 例：伊红美兰乳糖培养基（简称EMB培养基）——用于食品卫生的微生物学检验，检验食品样品的“大肠菌群”的指标。 3.5.4 鉴别性培养基： 用于鉴别不同类型微生物的培养基。 在普通培养基中加入能与某种代谢产物发生反应的指示剂或化学药品，从而产生某种明显的特征性变化，以区别不同的微生物以便于根据目的选择性挑取或计数等。 大肠菌群的定义：指存在与大肠内的，分解乳糖产酸产气的G-短杆菌,包括大肠杆菌和产气肠杆菌和一些中间类型的细菌。 伊红和美蓝二种苯胺染料可抑制G+细菌和一些难培养的G-细菌的生长。在低酸度时, 这二种染料结合形成沉淀，起着产酸指示剂的作用. 试样中的多种肠道菌会在EMB培养基上产生相 互容易区分的特征菌落, 因而易于辨认。 例如：大肠杆菌强烈分解乳糖而产生大量的混合酸, 菌体呈酸性,菌落被染成深紫色，从菌落表面的反射光中还可看到绿色金属闪光。 * 不同类群的微生物——细菌、放线菌、酵母菌、霉菌 不同营养类型微生物——自养菌、异养菌 特殊类型的微生物——如固氮菌 不同营养类型的微生物对营养的需求差异很大，应根据所培养的菌种对营养要素的不同需求进行配制。 四大类微生物常用培养基 * 2.注意各种营养物质的浓度与配比 营养物的浓度：在一般情况下，浓度合适的营养物质才对微生物表现出良好作用，浓度大时对微生物生长起抑制作用，浓度小时不能满足微生物生长的需要。 各营养物质之间的浓度比：培养基中各营养物质之间的浓度比直接影响微生物的生长与繁殖和（或）代谢产物的形成与积累，尤其是碳氮比（C／N）（碳氮比一般指培养基中元素碳与元素氮的比值，有时也指培养基中还原糖与粗蛋白两种成分含量之比）的影响更为明显。例如在微生物的谷氨酸发酵中，培养基的C／ N为4：l时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少；当C／N为3：1时，菌体繁殖受到抑制，而谷氨酸大量增加。 一般培养基 C/N为100/0.5~2 谷氨酸发酵培养基 为100/11~21 放线菌蛋白酶培养 为100/10~20 谷氨酸生产中； C/N 为1/4时，菌体大量繁殖，谷氨酸积累少； 当C/N为1/3 时，菌体生长受抑制，而谷氨酸大量增加。 五种常用氮源中的含氮量 NH3 82% CO( HN2 )2 46% NH4NO3 35% (NH4)2CO3 29.2 (NH4)2SO4 21% * .控制培养基的PH值。 * 表示方法：Eh 或 rH2，单位为V（伏）或mV（毫伏） E’：pH=7.0时的某对氧化还原偶的氧化还原电势 各种微生物对培养基的氧化还原电势的要求： 好氧微生物：适宜的Eh=+0.3~+0.4V，在Eh0.1V以上的环境中均能生长 兼性厌氧微生物：+0.1V以上呼吸、+0.1V以下发酵 厌氧微生物：只能在+0.1V以下生长 培养基是多氧化还原偶的复杂电化学系统，测出的Eh值仅代表其综合结果。 对微生物影响最大的是：分子氧和分子氢的浓度 培养基中常用的还原剂：巯基乙酸、抗坏血酸、硫化氢、半胱氨酸、谷胱甘肽、二硫苏糖醇等。 * 4.经济节约 配制培养基时，应尽量考虑利用价廉并且易于获得的原料作为培养基的成分，特别是在工业发酵中，培养基用量很大，更应该考虑到这一点，以便降低产品成本。】 设计培养基时应考虑该培养基的应用目的，即： 是培养菌体还是积累代谢产物？ 是实验室种子培养还是大规模发酵？ 代谢产物是初级代谢产物还是次级代谢产物？ * Types of Culture Media Culture media may be classified into several categories depending on their composition or use. A chemically-defined (synthetic) medium (Table 4a and 4b) is one in which the exact chemical composition is known. A complex (undefi