甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜L型钙通道影响.pdfVIP

摘要 摘 要 目的： 研究甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜L型钙离子通道的影响。通过甘松挥 发油对钙离子通道电流(Ic。．L)的量．效曲线、电流．电压(I—V)曲线、激活曲线 和失活曲线的影响，探讨甘松挥发油在离子通道水平抗心律失常机制以及其电 生理机制。 方法： 1．用急性酶解分离法分离大鼠心室肌细胞，以肝素抗凝，水合氯醛麻醉大鼠 后，迅速游离并取出大鼠心脏，悬挂于Langendoff灌流系统离体灌流。先采用 无钙台氏液灌流离体心脏约5分钟，再以50微摩尔／升(Ltmol／L)含蛋白酶E (ProNase I)的低钙酶液灌流心脏，待心脏质地 E)和胶原酶I(CollagenNase 液灌流心脏，冲洗灌流系统及心脏中残留酶液，然后剪下心室肌组织块并置于 盛有KB液的烧杯中充分剪碎、轻轻吹打、200目尼龙网过滤后置于KB液中室 温下静置约1．2小时，然后放入4℃冰箱保存。 2．采用标准的全细胞膜片钳技术(电压钳)，选取杆状边缘完整、无收缩、横 纹清晰和大小适中的细胞在室温下(20—25℃)进行膜片钳电流记录，以电阻为 1．0．3．0兆欧姆(MQ)的玻璃微电极封接大鼠心室肌细胞，形成吉欧高阻封接水 平后以适当程度的负压破膜，补偿串联电阻和细胞膜电容(Cm)，形成全细胞汜 录模式，分别测定1c。．L的量．效曲线、电流．电压(I．V)曲线、激活曲线和失活 曲线，观察不同浓度的甘松挥发油对大鼠心室肌细胞膜Ic。．L的影响。 结果： L型钙电流。 31．tg／g，5 1．1 的抑制率分别为(1 (100-士0)％(每个浓度n=5，P0．05)。 2．甘松挥发油对lc。．L的电流密度．电压关系曲线(current density。voltage 摘要 线上移，但激活电位、峰电位及反转电位无改变。 3．甘松挥发油对Ic}L激活动力学影响：使激活曲线向正电位方向变化，Vl／2 减小至4．50士O．40(n=5，PO．05)。 4．甘松挥发油对I。a．L失活动力学影响：使失活曲线向负电位方向变化，Vl，2 增大至11．05+0．86(n=5，PO．05)。 结论： 1．甘松挥发油可呈浓度依赖性抑制大鼠心室肌细胞膜Ic}L电流，随着浓度 增加阻断作用增强。 2．甘松挥发油可使Ic。．L的电流密度一电压关系曲线(I-V曲线)上移，但不 改变曲线形状、激活电位、峰电位及反转电位。 3．甘松挥发油使Ic。．L激活曲线(activationcurve)右移，减慢激活。 4．甘松挥发油对Ic扣L失活曲线(inactivationCUrve)左移，加快失活。 关键词：甘松挥发油；膜片钳；L型钙通道；心室肌细胞 Abstract ABSTRACT objective： Batal To theeffectsoftheVolatileOilof Chinensis study Nardostachys C一+channelofisolatedventricular intherats．To (VONCB、onL—type myocytes the mechanismsofVONCB． anti-arrhythmic explore Methods： Ventricular wereobtained from myocytes enzymaticallySD(SpragueDawley)